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培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)(培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么))

来源:http://1zy.cn/ 作者:第一中药材网 发表于:2024-05-17 17:51:39  点击:0
今天给各位分享培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)的知识,其中也会对培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!本文导读目录:1、培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)2、培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)3、培养基添加什么
今天给各位分享培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)的知识,其中也会对培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!

本文导读目录:

1、培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)

2、培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)

3、培养基添加什么作用是什么意思(培养基是由什么加什么构成的)

4、培养基牛胆的作用(ngm培养基胆固醇作用)

培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)

不是化工产品,青霉素悬是生物合成的。青霉素是抗菌素的一种,是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素,是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素类抗生素是β-内酰胺类内酰胺类中一大类抗生素的总称。

是用玉米分离出淀粉,做培养基来培养的,我们的华北制药是50年苏联帮助建厂投产的,主要是青霉素,每年需要10亿多斤玉米。

因为青霉素生物合成采用玉米浆作为氮、无机盐和生长辅助因子的主要来源,玉米浆中的肌醇六磷酸化合物(植酸盐)是对青霉素合成起重要作用的辅助刺激因子。在青霉素发酵中,可用玉米浸液的沉淀物代替玉米浆,与玉米浆相比,这种沉淀物含较高的肌醇六磷酸和较低的氮含量。

培养基的种类很多.据培养基的用途可以将培养基分为选择培养基、鉴别培养基.选择培养基是指在培养基中加入某些化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进需要的微生物的生长.例如,当需要酵母菌和霉菌时,可以在培养基中加入青霉素,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离出酵母菌和霉菌.病毒是专营寄生生活的微生物,它只能生活在活的细胞中,不能在普通培养基中培养.

青霉菌分泌出的物质叫做青霉素

1928年9月的一天早晨,英国伦敦圣玛丽医院的细菌学家弗莱明像往常一样,来到了实验室。

  在实验室里一排排的架子上,整整齐齐排列着很多玻璃培养器皿,上面分别贴着标签写着:链状球菌、葡萄状球菌、炭疽菌、大肠杆菌等。这些都是有毒的细菌,弗莱明收集了它们,是在寻找一种能够制服它们,把它们培养成无毒细菌的方法。尤其是其中的一种在显微镜下看起来像葡萄球状的细菌,存在很广泛,危害也很大,伤口感染化脓,就是它在“作怪”。弗莱明试验了各种药剂,力图找到一种能杀它的理想药品,但是一直没有成功。

  弗莱明来到架子前,逐个检查着培养器皿中细菌的变化。当他来到靠近窗户的一只培养器前的时候,他皱起了眉头,自言自语道:“唉,怎么搞的,竟然变成了这个样子!”原来,这只贴有葡萄状球菌的标签的培养器里,所盛放的培养基发了霉,长出一团青色的霉花。

  他的助手赶紧过来说:“这是被杂菌污染了,别再用它了,让我倒掉它吧。”弗莱明没有马上把这培养器交给助手,而是仔细观察了一会儿。使他感到惊奇的是:在青色霉菌的周围,有一小圈空白的区域,原来生长的葡萄状球菌消失了。难道是这种青霉菌的分泌物把葡萄状球菌杀灭了吗?

  想到这里,弗莱明兴奋地把它放到了显微镜下进行观察。结果发现,青霉菌附近的葡萄状球菌已经全部死去,只留下一点枯影。他立即决定,把青霉菌放进培养基中培养。

  几天后,青霉菌明显繁殖起来。于是,弗莱明进行了试验:用一根线蘸上溶了水的葡萄状球菌,放到青霉菌的培养器中,几小时后,葡萄状球菌全部死亡。接着,他分别把带有白喉菌、肺炎菌、链状球菌、炭疽菌的线放进去,这些细菌也很快死亡。但是放入带有伤寒菌和大肠杆菌等的线,这几种细菌照样繁殖。

  为了试验青霉菌对葡萄状球菌的杀灭能力有多大,弗莱明把青霉菌培养液加水稀释,先是一倍、两倍……最后以八百倍水稀释,结果它对葡萄状球菌和肺炎菌的杀灭能力仍然存在。这是当时人类发现的最强有力的一种杀菌物质了。

  可是,这种青霉菌液体对动物是否有害呢?弗莱明小心地把它注射进了兔子的血管,然后紧张地观察他们的反应,结果发现兔子安然无恙,没有任何异常反应。这证明这种青霉菌液体没有毒性。

  1929年6月,弗莱明把他的发现写成论文发表。他把这种青霉菌分泌的杀菌物质称为青霉素。

  人们向他祝贺。英国一位显贵建议他申请制造青霉素的专利权,那样将来就会发大财。弗莱明经过考虑,写信婉言拒绝了那位显贵的建议。他说:“为了我自己和我一家的尊荣富贵,而无形中危害无数人的生命,我不忍心。”

  弗莱明发现青霉素,似乎是偶然的,但却是他细心观察的必然结果。让人又感到遗憾的是,当时青霉素还无法马上用于临床治疗,因为青霉素培养液中所含的青霉素太少了,很难从中提取足够的数量供治疗使用。如果直接用它的培养液来治病,那一次就要注射几千甚至上万毫升,这在实际上无法办到。因此,弗莱明只好暂时停止了对青霉素的培养和研究工作。但是他的发现,为后来的科学家开辟了道路。

  时间到了1940年,在牛津大学主持病理研究工作的澳大利亚病理学家佛罗理,仔细阅读了弗莱明关于青霉素的论文,对这种能杀灭多种病菌的物质产生了浓厚的兴趣。但是他知道,要提取出这种物质,需要各方面科学家的共同努力。他邀请了一些生物学家、生物化学家和病理学家,组成了一个联合实验组。这之中,德国生物化学家钱恩是他最主要和得力的助手。

  在佛罗理的领导下,联合实验组紧张地开展了研制工作。细菌学家们每天要配制几十吨培养液,把它们灌入一个个培养瓶中,在里面接种青霉菌菌种,等它充分繁殖后,再装进大罐里,然后送到钱恩那里进行提炼。

  提炼工作繁重而艰难,一大罐培养液只能提炼出针尖大小的一点点青霉素。经过几个月的辛勤工作,钱恩提取出了一小匙青霉素。把它溶解在水中,用来杀灭葡萄状球菌,效果很好。即使把它稀释二百万倍,仍然具有杀灭能力。

  联合实验组选择了50只小白鼠来进行试验;把每只都注射了同样数量,足以致死的链状球菌,然后给其中25只注射青霉素,另外25只不注射。实验结果,不注射青霉素的白鼠全部死亡,而注射的只有一只死去。

  随后,他们开始了更努力的提取工作,终于获得了能救活一个病人所需的青霉素,并救活了一名病人。证明了这种药物的无比效能。

  佛罗理清醒地意识到,为青霉素能广泛地用于临床治疗,必须改进设备,进行大规模生产。但这对联合实验组来说,还是无法办到的事。而且,当时的伦敦正遭受德国飞机的频繁轰炸,要进行大规模生产也很不安全。

  1941年6月,佛罗理不顾钱恩的反对,带着青霉素样品来到不受战火影响的美国。他马上与美国的科学家们开始合作。经过共同努力,终于制成了以玉米汁为培养基,在24℃的温度下进行生产的设备。用它提炼出的青霉素,纯度高,产量大,从而很快开始了在临床上的广泛应用,一些传染病的死亡率大大下降,无数人的生命得到了拯救。

  1845年,弗莱明、佛罗理和钱恩三人,因在青霉素发现利用方面做出的杰出贡献,共同获得了诺贝尔生理学及医学奖金。

如果没有加入对紫外线敏感的抗生素如四环素,青霉素,纯粹的lb培养基用紫外段时间照射没有问题,如果有这些抗生素则会促进抗生素分解,因此,要避光保存。

选择培养基主要有:

1.以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌

2.不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物

3.培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌

4.培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌 鉴别培养基主要有: 伊红--美蓝培养基可鉴别大肠杆菌

青霉素G生产可分为菌种发酵和提取精制两个步骤。

①菌种发酵:将产黄青霉菌接种到固体培养基上,在25℃下培养7~10天,即可得青霉菌孢子培养物。

用无菌水将孢子制成悬浮液接种到种子罐内已灭菌的培养基中,通入无菌空气、搅拌,在27℃下培养24~28h,然后将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中,通入无菌空气,搅拌,在27℃下培养7天。在发酵过程中需补入苯乙酸前体及适量的培养基。

培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)

7.5%NaCl肉汤培养基的作用是提供微生物生长所需要的营养成分以及维持渗透压。

用途为一般用于细菌培养,转种,复壮,增菌等(GB标准),常见的用法有金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的培养。

培养基都含有这几部分:碳源(提供碳,可以是碳酸盐)、氮源(提供氮)、无机盐(包括微量元素)、水、凝固剂(凝固作用。不一定会添加,取决于你想使培养基凝固到什么程度,一般使用琼脂)。但对于不同种类微生物的培养这些成分、配比是不同的。有的培养基还含有特殊成分,如抗菌素、色素、激素和血清。总之就是碳源氮源无机盐提供微生物所需营养,凝固剂制造适宜的生存环境,特殊添加成分满足该微生物的特殊需求。

配制要根据你所要培养的微生物进行配制,每种微生物都不同,你需要去详细查资料。

lb培养基由蛋白胨,酵母膏,nacl组成。首先,蛋白胨是经过胰酶处理过的蛋白,处理后,大分子的蛋白分子量变小,细菌更容易利用,此外,还含有嘌呤,提供生长因子。

如要培养大肠杆菌,其实用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是没有问题的。蛋白胨为细菌的生长提供氮源。

其次培养基中的酵母膏酵母提取物主要成分是氨基酸,小肽,核甘酸,b族维生素,主要为细菌提供维生素和微量元素,是细菌生长所必须的。氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压,兼能可提供无机盐。

(1)合成培养基2)天然培养基(3)半合成培养基 合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质 由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。

在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。

培养基的用途一般就是培养筛选菌种或鉴别,所以分为二大类:

1、选择性培养基:一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。

2、鉴别培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。例如,伊红美蓝乳糖培养基(EMB)。

扩展资料:

培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。

植物培养基的成分主要是琼脂和植物激素1、加入琼脂所做成的固体培养基有不少优点,如操作简便,对培养物的支持、通气较易解决。便于经常观察研究等。但也有其缺点,如培养物于培养基的接触(即吸收)面积小,各中养分与激素在琼脂中扩散较慢,并且各自扩散速度不同,使养分的补充慢等等2、植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物,它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育, 影响的植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许许多多的生理生化活动。

如:生长素类

生长素的生理作用主要是促进细胞生长和细胞分裂, 诱导受伤的组织表面一至数层细胞恢复分裂能力,形成愈伤组织;促进生根, 在常规扦插繁殖和组织培养中都用于诱导根的形成。细胞分裂素

细胞分裂素的生理作用是多方面的,主要可归纳为:①促进细胞分裂与扩大(与生长素促进细胞伸长的作用不同),可使茎增粗,而抑制伸长;②诱导芽的分化, 促进侧芽萌长,当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时, 诱导芽的分化,这时细胞分裂素起着主导作用;③抑制衰老,离体的组织或器官会很快衰老,如用细胞分裂素处理则可延缓衰老过程,有保鲜的效果。赤酶素类

赤酶素(GA) 的生理作用主要是:①诱导芽的细胞伸长,对根则无效,对矮生型植物恢复成高生型特别有效,常用伸长效应来作为GA生物测定的方法,如水稻幼苗、矮生玉米、矮生菜豆等。植物组织培养中常用来促进幼苗茎的伸长生长;②赤酶素对形成层的细胞分化有影响,往往同生长素有协合作用,IAA/GA比值高有利于木质部分化,比值低利于韧皮部分化;③赤酶素还可比代替低温和长日照,使一些两年生植物在当年就开花,可加快育种进程;④赤酶素可比破除种子、块茎、鳞茎等休眠,使之提盟发。GA还对生长素和细胞分裂素的活性有增效作用。GA不耐热,高压灭菌后将有70-100%失效,应当采用过滤灭菌法加入。脱落酸

脱落酸抑制蛋白质合成,抵消和抑制生长素、细胞分裂素和赤酶素发挥作用。还可诱导休眠,促进衰老和脱落。短日照条件诱导的脱落酸合成,而长日照条件诱导赤酶素的合成,这两种激素又控制和触发许多其它生理效应,如延缓生长,促进落叶,形成休眠芽(秋季短日照),或者促进生长、诱导开花(春夏季长日照)等。这些因素在离体培养时依然发生作用。

选择培养基是指根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

常用的选择培养基有:

伊红美蓝培养基(大肠杆菌)

PDA培养基(真菌)

MRS培养基(乳酸菌)

高氏一号培养基(放线菌)

是高温链霉菌与细菌的一种培养基 YG培养基:酵母膏0.3%,胰蛋白胨0.5%,葡萄糖0.5%,pH9. MOPS培养基是含3-(N- 吗啡啉)丙磺酸或称马啉丙烷磺酸 的培养基, 其他的还有: YGG培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,葡萄糖0.5 %,氯化钠0.5 %,pH自然; YM培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,麦芽糖0.5 %,pH自然或9.0; Yg培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5%,半乳糖0.5%,pH9.0; YG培养基:酵母膏0.3%,胰蛋白胨0.5%,葡萄糖0.5%,pH9.0; YS培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,蔗糖0.5%,pH9.0; YA培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,淀粉0.5 %,pH9.0; 固体培养基:液体培养基加2 %琼脂粉 SB培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白陈309,酵母提取物209,MoPs19,pH7.0。 SOC培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白脉209,酵母提取物59,NaCI0.59,250mmol/LKCI溶液10mlpH7.0。临用前加人Zmol/LMgC12溶液5ml和1mol/L葡萄糖溶液20ml。

1.基础培养基:

肉汤。含牛肉浸液和蛋白胨。广泛用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。

2.营养培养基:

基础培养基中加入特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。如血琼脂平板、巧克力血平板。

3.鉴别培养基:

观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物通过指示剂显示来鉴别细菌。 如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。

4.选择培养基:

加入抑制剂抑制标本中杂菌生长, 有助于所选择的细菌种类生长(SS琼脂)。

5.特殊培养基:

厌氧培养基和细菌L型培养基(疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基、高渗培养基)等。

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。

按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基,大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6。C的冰箱内。

培养基添加什么作用是什么意思(培养基是由什么加什么构成的)

由碳源、氮源、无机盐和水四部分组成。

选择培养基是指根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。常用的选择培养基有:伊红美蓝培养基(大肠杆菌)PDA培养基(真菌)MRS培养基(乳酸菌)高氏一号培养基(放线菌)

培养基主要为了模拟血液和组织液,主要成分具有溶解能力的液体,缓冲液和ph指示剂,盐,营养,生长因子和激素。

希望对你有帮助

包括碳源、氮源、无机盐、水和生长因子等化学成分。

培养基一般都由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的有机添加物组成。

HL意为来自肝脏的4种溶于氯仿的级分(HL-1至HL-4)中的一种,它们含有瑞士乳杆菌(Lactobacillus helvecticus)和乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)的生长因子,并可能和叶酸以及硫辛酸有关。

按照物理性质,植物组织培养基主要分为液体培养基,半固体培养基,固体培养基三种类型。

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。

按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基,大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。

不一样,我是学生物的,培养基是总成,有固体和液体培养基,像琼脂和牛肉蛋白胨就是固体培养基,培养液是液体培养基的组成,培养基就是培养皿里的各种条件综合

一、mem简介:

MEM是2-甲氧基乙氧基甲基氯的英文简写,是合成罗红霉素的中间体,也是有机化学中极重要的羟基保护基之一。

二、主要用途:

1、用作罗红霉素的中间体。

2、1-氯甲氧基-2-甲氧基乙烷 (MEMCl) 被定义为有机合成中的重要保护基。它可以在温和的条件下与羟基、氨基和羧酸反应生成相应的醚、取代胺和酯,生成的产物也可以在多种条件下脱去保护基。

三、dmem简介:

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养。

培养基牛胆的作用(ngm培养基胆固醇作用)

培养基配方(成分g/L):

蛋白胨 10.0;牛肉提取物 10.0;酵母提取物 5.0;葡萄糖 20.0

柠檬酸三铵 2.0;乙酸钠 5.0;MgSO4 0.1;MnSO4 0.05;K2HPO4 2.0

吐温80 1.0

配制方法:

1.称取55g本产品,加入1000ml纯水重悬。

2.调节pH。

3.121°C灭菌15min。

MRS培养基结果与分析

乳杆菌的生长表现为培养基变浑浊。由于营养要求的不同,某些乳杆菌在该培养基上生长较差或不能生长。

应用:

MRS肉汤培养基用于降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解机理研究。

用途:

MRS肉汤培养基根据DeMan、Rogosa和Sharpe法用于各种材料中乳酸菌菌种的增菌、培养和分离。 乳酸菌MRS肉汤和MRS琼脂培养基(MRS固体培养基)也能用于乳杆菌鉴定中的检测实验。

工作原理:

蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作为维生素来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。培养基的微酸性环境,有利于乳酸杆菌的生长。乙酸钠和柠檬酸铵是选择剂,同时也是能量物质。乙酸钠对革兰氏阴性细菌和霉菌有抑制作用,但对乳酸杆菌无影响。硫酸镁和硫酸锰提供代谢必需的离子。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳杆菌对营养物质的利用。

麦康凯琼脂培养基(Mac conkey,MAC)简称:Mac培养基。主要成分:蛋白胨、脙胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠、琼脂、乳糖、1%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液.麦康凯平板的原理:利用胆盐来抑制革兰阳性细菌的生长,而对伤寒等沙门菌有促进生长的作用。利用乳糖发酵,中性红的颜色可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌区别开。ss培养基又称沙门菌及志贺培养基,菌呈无色菌落,大肠埃希菌呈桃红色菌落用于粪便、分泌物中肠道致病菌及肠球菌的分离培养。

MEM-EBSS培养基与DMEM培养基有什么区别MEM培养基是哺乳动物细胞的理想培养基,通常用于贴壁细胞的培养,通过对配方进行修正,可以用于其他类型细胞的培养,如无钙MEM培养基可以用于悬浮细胞的培养,含有Hank’s盐的MEM培养基可以用于二倍体细胞的培养.体外培养细胞所需的营养物质与体内相同,主要有糖、氨基酸和维生素三大类.目前市面上销售的合成培养基如1640、199等所含的氨基酸已足够,但在使用合成培养基时,仍需加入一些天然成份,如人或动物的血清、血浆和胎汁等.目前主要使用血清,以牛血清为主.血清的生物效应早已证明,它含有多种促细胞生长因子、促贴附因子及其它活性物质等.不仅能促进细胞增长且能帮助细胞贴壁.不同血清对细胞作用不同. DMEM培养基和1640培养基在用途上还有不小的区别,如DMEM培养基体外培养的巨噬细胞存活率和成层率高、吞噬能力强,与RPMI 1640相比,DMEM可作为一种简单而实用的体外分离培养巨噬细胞的培养基.

准备工作

1、 缓冲液1×TSS的配制:

事先配制1M的氯化镁——20.3g氯化镁(6分子水结晶)/定容于100ml去离子水后封装,不用灭菌。

取 干净的100ml 量筒和100ml 烧杯,用量筒量取100ml去离子水,加入至烧杯中,取 1 g 蛋白胨,0.5g酵母抽提物,0.5g氯化钠,10 g PEG(MW= 3350), 5ml DMSO,5ml 的1 M氯化镁,溶解后用盐酸或者氢氧化钠调整pH为6.5,混匀后用0.22um 滤器过滤除菌。储存在4度,保质期约6个月。

2、已划平板(或者用枪头沾取并稀释后涂布)并在培养箱中培养的菌种——Dh5α,用于接种并振荡培养。.两个锥形瓶,分别装有30 ml和50mlLB,灭菌后置于4℃冰箱备用。

3、 若干已灭菌的琼脂平板,一个未加抗生素,用于第二步的接种。其余做转化用。

大鼠细胞 TSS方法制备感受态细菌(又称一步法)二、 感受态制备程序:

1、 前一天晚上调单菌落至30 mlLB中培养(12-16h),按1:100 比例将培养的菌液(500ul)加入到新鲜的50 ml LB培养液中,于37 ℃振荡培养至OD600约为0.4(培养时间2h40~50min)。冰浴30分钟后4度1000g离心10min,弃上清,收获细菌。加入原体积十分之 一(这里为5 ml)的1× TSS 液(冰预冷)悬浮细胞,然后分装成100 ul/份,全部冰上操作,-80度保存。

大鼠细胞 TSS方法制备感受态细菌(又称一步法)三、 转化时取一管(100 ul)感受态细菌,(冻存细胞应 置于冰上缓慢融化后立即使用)加入3-5ul DNA(0.1~100ng),轻轻混匀后冰浴30min。加入0.9ml含20mmol/L葡萄糖的LB培养液,37度150r/min温和振荡培养 60min,涂布,室温放置约20分钟后放于37度恒温培养箱培养(17-20h)


培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于培养基添加什么作用是什么(培养基的作用是什么)培养基中青霉素的作用(青霉素在培养基中的作用)的信息别忘了在本站进行查找喔。

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