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DNA.RNA聚合酶的作用(dna聚合酶和rna)(dnaladder作用(dna的作用是什么?))

来源:http://1zy.cn/ 作者:第一中药材网 发表于:2023-07-01 19:13:50  点击:1
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今天给各位分享DNA.RNA聚合酶的作用(dna聚合酶和rna)的知识,其中也会对dnaladder作用(dna的作用是什么?)进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!

本文导读目录:

1、DNA.RNA聚合酶的作用(dna聚合酶和rna)

2、dnaladder作用(dna的作用是什么?)

DNA.RNA聚合酶的作用(dna聚合酶和rna)

真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。

原核生物RNA聚合酶

研究得最清楚的是大肠杆菌RNA聚合酶。该酶是由五种亚基组成的六聚体(α2ββ'ωσ)分子量约500 000。其中α2ββ'ω称为核心酶,σ因子与核心酶结合后称为全酶。

相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。不同点:

1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。

2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。

3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。

4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程。

DNA分子复制需要模板、原料、能量和酶等基本条件。在细胞内,DNA能组织成染色体结构,整组染色体则统称为基因组。

染色体在细胞分裂之前会先行复制,此过程称为DNA复制。对真核生物,如动物、植物及真菌而言,染色体是存放于细胞核内;对于原核生物而言,如细菌,则是存放在细胞质中的拟核里。

染色体上的染色质蛋白,如组蛋白,能够将DNA组织并压缩,以帮助DNA与其他蛋白质进行交用,进而调节基因的转录。

DNA携带有合成RNA和蛋白质所必需的遗传信息,是生物体发育和正常运作必不可少的生物大分子。

rna聚合酶是以一条DNA链或RNA为模板,三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶,因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关,所以也称转录酶。rna聚合酶作用于磷酸二酯键。

rna聚合酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板,二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的反应表示为:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5’→3',第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后每加入一个核苷酸脱去一个焦磷酸,形成磷酸二酯键,焦磷酸迅速水解的能量驱动聚合反应。与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶无须引物,它能直接在模板上合成RNA链;RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,所以转录时无须将DNA双链完全解开,RNA聚合酶无校对功能。

RNA聚合酶催化RNA的合成,其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点:①以DNA为模板;②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸;③聚合反应是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯键的反应;④以3’→5’方向阅读模板,5’→3’方向合成核酸;⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。

RNA解旋酶,DNA连接酶,DNA解旋酶与氢键有关。

DNA聚合酶与3-5磷酸二酯键有关

dnaladder作用(dna的作用是什么?)

DNA模板的作用可以画制各种图案

凋亡细胞内由特异核酸酶水解核小体间的连接DNA产生的大小为180~200bp整数倍的DNA片段,在琼脂糖电泳时形成的阶梯状条带。

DNA梯状标志(DNA ladder marker)是指一系列含碱基对数目不同的DNA片段组成,凝胶电泳后DNA条带呈阶梯状分布,可作为样本DNA分子大小的标志物。

实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。

检测指标是:各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,GoldView染色,检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。

原理:

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

中文名称:REALBAND 100 BP DNA 分子量标准 LADDER

英文名称:RealBand 100 bp DNA Ladder

CAS号:

分子式:

分子量:0

区别就是两者意思是不一样,具体的不同如下,marker中文意思是n. (地点或方向的)标识,标志;(性质或特点的)标志;记号笔(marker pen);<英>阅卷人;<英>(足球等比赛中的)盯人队员;参照标准;标志基因;<美,非正式>本票,借据;(比赛,尤指斯诺克或台球)记分员;无线电导航信标


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