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4、提取蛋白质测定还原力的作用(提取蛋白质测定还原力的作用是)
提取液有什么作用(提取液是如何提取的)果酸就是从水果中提取的各种有机酸,是存在于多种天然水果或酸奶中的有效成分。
果酸制作方法是比较简单的,把猕猴桃1个、柠檬半个、番茄1个、冰糖2两、蜂蜜一两、奶粉适量都准备好,然后按照步骤要求就可以把果酸做出来,是非常方便的。
首先准备食材:猕猴桃1个、柠檬半个、番茄1个、冰糖2两、蜂蜜一两、奶粉适量。
果酸制作方法:
1、首先将冰糖蜂蜜倒入锅中,再倒入一些水烧热煮化,熬制时要用勺子不停的搅拌,千万不可以弄糊了。
2、奶粉中倒入温水,不停的搅拌均匀,再放入锅内一起熬开即可。
3、关火后,再将猕猴桃包皮,柠檬用刀切开把籽取出,热水烫过的番茄剥了皮。
4、把猕猴桃、柠檬、番茄一同放到搅碎机或打汁机中打碎成浆,打完后用纱布或豆包布把打碎的果浆过滤成果酸汁,这样果酸就制作好了。
胡萝卜素的化学性质稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂,常采用萃取法提取.提取流程为:胡萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素-鉴定.胡萝卜素的鉴定常采用纸层析法.
在胡萝卜素的提取过程中,萃取液的浓缩可以直接使用蒸馏装置,将来萃取液会流入冷凝装置的回收容器中,胡萝卜素会留在蒸馏瓶中.
植物原液是指采集无污染的天然植物,采用当前国际上最先进的二次高效植物纯化分离技术-“高效液相色谱技术”和“液相超微膜分离技术”,把植物的花、叶、茎、果实中一次分离出来的植物提取物或提取液进行二次分离,所得到含有植物功效成分的高纯度液体。
叶绿体中色素提取和分离中,层析液为什么有几种成分提取液和层析液都是有机溶剂,都能溶解色素.作用不同:提取液是提取色素,层析液是分离色素.成分不同:提取液一般用丙酮,层析液是由20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成.
萃取蒸馏是化学上常用的分离液体混合物的实验方法,原理是用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取,将绝大部分的化合物提取出来。 萃取蒸馏所用的仪器有酒精灯,铁架台,石棉网,锥形瓶,牛角管,烧杯,冷凝器等实验室常用仪器。萃取和蒸馏已经广泛应用到日常生活和工业生产中。
中文名
萃取蒸馏
外文名
extractive distillation
仪器
酒精灯,铁架台,石棉网、锥形瓶
萃取
通用于石油炼制工业
按操作压强分
加压、减压
在茶叶中提取茶多酚的工艺主要有以下的几种方法:
1. 传统工艺:以水或乙醇为溶剂,采用水浴加热至80℃ 保温提取多次。合并提取液后用等体积的氯仿萃取,分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取,将乙酸乙酯大部回收后浓缩近干,冷冻干燥后用去离子水反复重结晶即得精品。但该法的缺点是操作费时麻烦、溶剂消耗量大、毒性大、成本高、提取率低,在高温下提取,茶多酚易氧化变质等。
2.用微波辐射萃取茶多酚:提取溶剂为50%乙醇,功率320瓦,萃取时间18秒,液固比(mL/g)1:9,二级提取,此条件下的茶多酚的提取率为92.7%。与传统的索氏提取相比,微波法提取的最大优点是提取时间大大缩短,且提取率较高。而与超临界二氧化碳萃取相比,它成本低,投资少,提取效率高。但不适合在实验室操作。三.现根据参考文献及相关数据,得本实验方案:1.实验原理:利用茶多酚易溶于乙醇、乙酸乙酯,而不溶于氯仿的性质来提取茶多酚。2.实验器材与试剂:器材:250ml的三口烧瓶,布袋,蒸发皿,分液漏斗,等;试剂:茶叶,碳酸钠,乙醇,氯仿,乙酸乙酯,蒸馏水,等。
3.实验步骤:a) 提取:将粉碎的10 g茶叶中加入2g碳酸钠并放入布袋内放好,置于三口烧瓶内,加乙醇50ml,加热煮沸0.5h,倾出提取液至蒸发皿内,再用10ml乙醇洗涤茶叶包,洗涤液并入提取液。b) 分离纯化:将装有提取液的蒸发皿置于石棉网上加热浓缩至提取液体积月约20ml,冷却至室温后将浓缩液移置分液漏斗,加入等量的氯仿萃取2次(萃取时振荡要轻,防止乳化),水层用于制备茶多酚。将氯仿萃取后的水层用等量乙酸乙酯萃取2次,每次20min,合并乙酸乙酯萃取液,水浴减压蒸馏(或旋转蒸发仪)回收乙酸乙酯,趁热将残液移入洁净干燥好的蒸发皿,改用水蒸气浴加热浓缩至近干,冷却至室温后,放入冰箱内冷冻干燥,将白色粉末茶多酚粗品,粗品用蒸馏水进行重结晶,得茶多酚精品。干燥后称量,计算产率。
在茶叶中提取茶多酚的工艺主要有以下的几种方法:
1. 传统工艺:以水或乙醇为溶剂,采用水浴加热至80℃ 保温提取多次。合并提取液后用等体积的氯仿萃取,分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取,将乙酸乙酯大部回收后浓缩近干,冷冻干燥后用去离子水反复重结晶即得精品。但该法的缺点是操作费时麻烦、溶剂消耗量大、毒性大、成本高、提取率低,在高温下提取,茶多酚易氧化变质等。
2.用微波辐射萃取茶多酚:提取溶剂为50%乙醇,功率320瓦,萃取时间18秒,液固比(mL/g)1:9,二级提取,此条件下的茶多酚的提取率为92.7%。与传统的索氏提取相比,微波法提取的最大优点是提取时间大大缩短,且提取率较高。而与超临界二氧化碳萃取相比,它成本低,投资少,提取效率高。但不适合在实验室操作。三.现根据参考文献及相关数据,得本实验方案:1.实验原理:利用茶多酚易溶于乙醇、乙酸乙酯,而不溶于氯仿的性质来提取茶多酚。2.实验器材与试剂:器材:250ml的三口烧瓶,布袋,蒸发皿,分液漏斗,等;试剂:茶叶,碳酸钠,乙醇,氯仿,乙酸乙酯,蒸馏水,等。
3.实验步骤:a) 提取:将粉碎的10 g茶叶中加入2g碳酸钠并放入布袋内放好,置于三口烧瓶内,加乙醇50ml,加热煮沸0.5h,倾出提取液至蒸发皿内,再用10ml乙醇洗涤茶叶包,洗涤液并入提取液。b) 分离纯化:将装有提取液的蒸发皿置于石棉网上加热浓缩至提取液体积月约20ml,冷却至室温后将浓缩液移置分液漏斗,加入等量的氯仿萃取2次(萃取时振荡要轻,防止乳化),水层用于制备茶多酚。将氯仿萃取后的水层用等量乙酸乙酯萃取2次,每次20min,合并乙酸乙酯萃取液,水浴减压蒸馏(或旋转蒸发仪)回收乙酸乙酯,趁热将残液移入洁净干燥好的蒸发皿,改用水蒸气浴加热浓缩至近干,冷却至室温后,放入冰箱内冷冻干燥,将白色粉末茶多酚粗品,粗品用蒸馏水进行重结晶,得茶多酚精品。干燥后称量,计算产率。
提取物质振荡的作用(提取物质振荡的作用是)萃取锡的萃取剂:常用的萃取方法是向水样中加入含无机酸和络合剂的有机溶剂,将锡萃取.以有机锡化物的形式. 锡的萃取通常样品中加入盐酸,经振荡或超声震荡后用溶剂萃取.另外可以增强离子对效应,有效提高有机锡如一丁基锡的萃取效率.常用的萃取剂有二氯甲烷,戊烷,己烷,异辛烷,乙酸乙酯,苯,甲苯,乙醚。
常用极性溶剂为乙酸溶液和盐酸或乙酸与极性溶剂的混合溶液,如盐酸和甲醇,盐酸和丙酮,以及极性溶剂与非极性溶剂的混合液,如二氯甲烷和甲醇等.
在多数情况下,一些固体样品在用酸或极性溶剂萃取后,再用与之不相溶的溶剂进行萃取,可将有机锡从原来萃取液中提取出来。利用环庚三烯酚酮或盐溶出效应可增加有机锡在有机溶剂中的溶解性,提高萃取率。
锡,金属元素,一种略带蓝色的白色光泽的低熔点金属元素,在化合物内是二价或四价,不会被空气氧化,主要以二氧化物(锡石)和各种硫化物(例如硫锡石)的形式存在。元素符号Sn。锡是大名鼎鼎的“五金”——金、银、铜、铁、锡之一。早在远古时代,人们便发现并使用锡了。
在我国的一些古墓中,便常发掘到一些锡壶、锡烛台之类锡器。据考证,我国周朝时,锡器的使用已十分普遍了。在埃及的古墓中,也发现有锡制的日常用品。
电缆振荡波检测技术主要用于交联聚乙烯电力电缆检测,是属于离线检测的一种有效形式。该技术基于LCR阻尼振荡原理,在完成电缆直流充电的基础上,通过内置的高压电抗器、高压实时固态开关与试品电缆形成阻尼振荡电压波,在试品电缆上施加近似工频的正弦电压波,激发出电缆潜在缺陷处的放电信号。
基于脉冲电流法高灵敏度检测局部放电信号,配合高速数据采集设备完成局部放电信号的检测、采集、上传。该技术具有以下突出优势:
1、对电缆无损坏。单次测试过程的时间为一分钟左右,测试效率高,对被测电缆无伤害;
2、局放检测可行度高。通过LC阻尼振荡对电缆试品施加近似于工频的正弦电压,在近似电缆运行状态的条件下完成局部放电信号的检测,且符合IEC及相关国家标准,局放检测结果具有很强的真实性;
3、适合现场巡检。该技术通过无源谐振技术取代传统的交流试验电源,系统体积及重量显著减小,实现了检测系统的便携性,极大降低并简化了电缆现场检测的难度与结构,可适用于现场大规模的巡检与普测;
4、判别局放类型并定位故障位置。该技术在近似工频状态下基于脉冲电流法高灵敏度检测局部放电,在此基础上提取局放脉冲的指纹信息,结合故障模式库判别实测故障类型;基于脉冲信号在电缆中传播的行波原理完成脉冲对的匹配,根据时间差算法精确计算故障点所在位置。
世界上实际任何的物质都是由各种频率的'振动″这一本质存在所体现出的虚幻的假象。
人眼看到的颜色只是振动频率在370~750太赫兹之间的光子流被人脑视觉系统接受后经过处理得到的只属于人类的感知。大自然并不存在'颜色”,这只是人类的主观感受。
人听到的声音只是物体振动产生的波动通过介质被听觉系统感知的频率振动现象。换句话说并不存在声音这个东西,只不过大脑通过信息处理让你感觉有东西在'响”,实质就是这个东西在'振动″。
除了颜色和声音是'振动″,你触摸到的任何一样实体物质,这种'实质″感觉本质也是'振动″。这个由于物体表面的原子也在不停地振动,看似平静的物体平面上原子由于受到温差的影响而在此起彼伏的振动,就象一锅煮沸的糑一样,而人手指表面的原子也在振动,振动与振动之间产生的压力让你感觉所触摸的东西是硬的或是软的。这是人脑的主观感受。
因此人类所有的感觉实质都是大自然的振动所致。这是因为任何的物质本身就是'振动″集合,单质在振动;化合物在振动;分子在振动;原子在振动。原子内部的电子、原子核以及原子核内的夸克粒子都在振动。
震荡时候不用打开活塞放气。
分液时打开玻璃塞是为了和大气相通,使液体能够顺利流下!!!!
血压计是测量血压的仪器,又称血压仪。血压计主要有听诊法血压计和示波法血压计。
听诊法血压计主要有:水银血压计(压力计)、弹簧表式血压计(压光柱血压计、光显血压计、液晶血压计等。
示波法又叫振荡法,它的原理是获取在放气过程中产生的振荡波,通过一定的算法换算得出血压值。 绝大多数的电子血压计均是采用示波原理来设计的。
血压
体循环动脉血压简称血压 (blood pressure,BP)。血压是血液在血管内流动时,作用于血管壁的压力,它是推动血液在血管内流动的动力 。心室收缩,血液从心室流入动脉,此时血液对动脉的压力最高,称为收缩压(systolic blood pressure,SBP)。心室舒张,动脉血管弹性回缩,血液仍慢慢继续向前流动,但血压下降,此时的压力称为舒张压(diastolic blood pressure,DBP)
发展历史
1628年,英国科学家威廉·哈维注意到当动脉被割破时,血液就像被压力驱动那样喷涌而出。通过触摸脉搏的跳动,会感觉到血压。
1835年,尤利乌斯·埃里松发明了一个血压计,它把脉搏的搏动传递给一个狭窄的水银柱,当脉搏搏动时,水银会相应地上下跳动,医生第一次能在不切开动脉的情况下测量脉搏和血压。但由于它使用不便,制作粗陋,并且读数不准确,因此其他的科学家对它进行了改进。血压计根据水银柱的高度测量血压,气压计以同样的方式测量气压。
1860年,法国科学家艾蒂安朱尔·马雷研制成了一个当时最好的血压计,它将脉搏的搏动放大,并将搏动的轨迹记录在卷筒纸上。这个血压计也能随身携带,马雷用这个血压计来研究心脏的异常跳动。
医生使用的血压计是意大利科学家希皮奥内·里瓦罗奇在1896年发明的。它有一个能充气的袖带,用于阻断血液的流动,医生用一个听诊器听脉搏的跳动,同时在刻度表上读出血压数[1] 。
工作原理
血压计的主要原理是指空气加压压迫局部动脉,通过施加压力,阻止局部动脉的搏动,从而测量这一时期的血流压力的过程[2] 。血压计的测量原理可分为听诊法和示波法两种。
听诊法又叫柯氏音法,也分为人工柯氏音法和电子柯氏音法。人工柯氏音法也就是我们通常所见到的医生、护士用压力表与听诊器进行测量血压的方法;电子柯氏音法则是用电子技术代替医生、护士的柯氏音测量方法[1]。其原理为缠缚于上臂的袖带,其压力作用于肱动脉。调节袖带气体改变压力,用听诊器听搏动的声音,从而得到收缩压和舒张压[1]。
示波法也叫振荡法,是20世纪90年代发展起来的一种比较先进的电子测量方法,其原理为自动调节缠缚于上臂的袖带的充气量,改变压力,血流通过血管具有一定的振荡波,由压力传感器接收,逐渐放气,根据振荡波的变化,压力传感器所检测的压力及波动也随之变化,选择波动最大的时刻为参考点,以这点为基础,向前寻某一个值的波动点为收缩压,向后寻某一个值的波动点为舒张压,该值不同厂家设定不同。
萃取,又称溶剂萃取或液液萃取,亦称抽提,是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作。即,是利用物质在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使溶质物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中的方法。广泛应用于化学、冶金、食品等工业,通用于石油炼制工业。另外将萃取后两种互不相溶的液体分开的操作,叫做分液。
固-液萃取,也叫浸取,用溶剂分离固体混合物中的组分,如用水浸取甜菜中的糖类;用酒精浸取黄豆中的豆油以提高油产量;用水从中药中浸取有效成分以制取流浸膏叫“渗沥”或“浸沥”。
虽然萃取经常被用在化学试验中,但它的操作过程并不造成被萃取物质化学成分的改变(或说化学反应),所以萃取操作是一个物理过程。
萃取是有机化学实验室中用来提纯和纯化化合物的手段之一。通过萃取,能从固体或液体混合物中提取出所需要的物质。
萃取的目的就是要分离提纯一种物质,原理是被提纯的物质在原溶剂和萃取剂中的溶解度差异,一般上是被提纯的物质在原溶剂中的溶解度小于在萃取剂中的溶解度,以至于被提纯的物质最终溶解在萃取剂中,达到分离提纯的目的。
振荡培养的目的是:增加溶液中的氧气,以满足切段细胞呼吸的需求。振荡培养,亦称摇瓶培养。是指把微生物细胞接种于液体培养基中,并放置在摇床或振荡器上不停振荡的一种培养方法。振荡能使培养基与氧气充分接触,
重结晶 将晶体溶于溶剂或熔融以后,又重新从溶液或熔体中结晶的过程。又称再结晶。重结晶可以使不纯净的物质获得纯化,或使混合在一起的盐类彼此分离。重结晶的效果与溶剂选择大有关系,最好选择对主要化合物是可溶性的,对杂质是微溶或不溶的溶剂,滤去杂质后,将溶液浓缩、冷却,即得纯制的物质。混合在一起的两种盐类,如果它们在一种溶剂中的溶解度随温度的变化差别很大,例如硝酸钾和氯化钠的混合物,硝酸钾的溶解度随温度上升而急剧增加,而温度升高对氯化钠溶解度影响很小。则可在较高温度下将混合物溶液蒸发、浓缩,首先析出的是氯化钠晶体,除去氯化钠以后的母液在浓缩和冷却后,可得纯硝酸钾。重结晶往往需要进行多次,才能获得较好的纯化效果 分液法 把两种互不混溶的液体分离开的操作方法.例如,碘的四氯化碳溶液与水的分离,就采用分液法加以分离. 分液使用的仪器是分液漏斗. 分液的操作步骤是:先用普通漏斗把要分离的液体注入分液漏斗内,加塞.然后将分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中(如需振荡液体,则应充分振荡后再静置).待液体分成两层后,旋开旋塞,使下层液体从漏斗管流下.在旋开旋塞之前,应该使分液漏斗顶部活塞上的凹槽或小孔对准漏斗上口颈部的小孔,使与大气相通,否则,液体就不能通过旋塞从下口流出.当下层液体流尽时,立即关闭旋塞,然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来. 萃取 概述 萃取是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作,利用相似相溶原理,萃取有两种方式:
液-液萃取,用选定的溶剂分离液体混合物中某种组分,溶剂必须与被萃取的混合物液体不相溶,具有选择性的溶解能力,而且必须有好的热稳定性和化学稳定性,并有小的毒性和腐蚀性。如用苯分离煤焦油中的酚;用有机溶剂分离石油馏分中的烯烃;用CCl4萃取水中的Br2. 固-液萃取,也叫浸取,用溶剂分离固体混合物中的组分,如用水浸取甜菜中的糖类;用酒精浸取黄豆中的豆油以提高油产量;用水从中药中浸取有效成分以制取流浸膏叫“渗沥”或“浸沥”。 虽然萃取经常被用在化学试验中,但它的操作过程并不造成被萃取物质化学成分的改变(或说化学反应),所以萃取操作是一个物理过程。 萃取是有机化学实验室中用来提纯和纯化化合物的手段之一。通过萃取,能从固体或液体混合物中提取出所需要的化合物。这里介绍常用的液-液萃取。
提取色素各试剂的作用(提取色素各试剂的作用是什么)光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中,可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
光合色素可溶于层析液中,不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样,最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
中学生物用无水乙醇或丙酮提取,利用色素容易溶解在有机溶剂中的特点提取。相比较丙酮有一定毒性。用99%以上的酒精,普通的不行。
分离光合色素的试剂:用层析液分离。用有机溶剂无水乙醇,或95%乙醇溶液,还可以用乙醚,丙酮代替。 分离光合色素的原理:不同的色素在有机物中溶解度不同,因此移动速率不一样。
溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样,最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。
纸层析法。色素在滤纸条上能分离的原因是四种色素随着层析液在滤纸上的扩散速度不同。四条色素带从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a,叶绿素b。
1纸层析法原理
纸层析法依据极性相似相溶原理,是以滤纸纤维的结合水为固定相,而以有机溶剂作为流动相。由于样品中各物质分配系数不同,因而扩散速度不同,从而达到分离的目的。
试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同。
作为单体鉴别时,试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置,应与对照(标准)样所显主色的谱斑点或供试品-对照品(1∶1)混合所显的主色谱斑点相同。作为质量指标(纯度)检查时,可取一定量的试样,经展开后,按各单体的规定,检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。作为含量测定时,可将色谱斑点剪下洗脱后,再用适宜的方法测定,也可用色谱扫描仪测定。
植物色素类常作为杂质除去,如在制备生物制剂或提取有效成分时加水稀释而使叶绿素析出,水溶性色素可用醋酸铅试剂沉淀或活性炭吸附除去。
随着科学研究的深入,已发现不少色素具药用价值,如紫草的萘醌类色素能抑菌,红花中的红花红素与红花黄素能活血化瘀与抗氧化,姜黄中的姜黄素(curcumin)能降血脂和抑菌,栀子中的栀子黄色素(gardenin)能抑菌。
我是搞生物研究,从专业角度回答你的问题,综合各方因素,经济,简便操作,易于获取等方面,考虑到实验无需过于精确,故此处采用第一种方法,以下是其详细说明:提取: (1) 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(2g左右),洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研。(2) 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊状,再加10-15ml 95%乙醇,离心35min,提取上清液过滤于三角瓶中,残渣用10ml 95%乙醇冲洗,一同过滤于三角瓶中。(3) 如无新鲜叶片,也可用事先制好的叶干粉提取。取新鲜叶片(以菠菜叶最好),先用105℃杀青,再在80℃下烘干,研成粉末,密闭储存。用时称叶粉2g放入小烧杯中,加95%乙醇20-30ml 浸提,并随时搅动。待乙醇呈深绿色时,滤出浸提液备用。分离: (1) 取圆形定性滤纸一张(直径11cm),将其剪成滤纸条(9cm×3cm),用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液,沿纸条的长度方向涂在纸条的一边(距边约1cm),使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内,风干后,再重复操作数次。(2) 在层析缸中加入适量的推动剂,将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中,使滤纸条下端浸入推动剂中。迅速盖好层析缸盖。此时,推动剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散,并把叶绿体色素向上推动,不久即可看到各种色素的条带。(3) 当推动剂前沿接近滤纸边缘时,取出滤纸,风干,即可看到分离的各种色素:叶绿素a为蓝绿色,叶绿素b为黄绿色,叶黄素为鲜黄色,胡萝卜素为橙黄色。用铅笔标出各种色素的位置和名称。
各种色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快,反之则慢。最快:胡萝卜素次之:叶黄素次之:叶绿素A 最慢:叶绿素B 最宽的是叶绿素A 最窄的是胡萝卜素胡萝卜素和叶绿素B最远叶绿素A和叶绿素B最近另外,绿叶中的色素中叶绿素含量约占3/4 类胡萝卜素含量约占1/4 光照中,红光有利于淀粉合成,蓝紫光有利于蛋白质的合成以下是实验改进方面要求:1 实验材料的改进:应根据不同地区不用气候选用不同叶片,但切记一点不用含蜡质叶片2:提取液的改进:丙酮易挥发且有毒,可选用无水乙醇替代3:层析液改进:一般教材给出两种配方:93号汽油或者20份石油醚+2份丙酮+1份苯,经研究发现以下四种方法较好:
1:CCI4+少许NASO4
2: 95%酒精
3:9份95%酒精+1份苯
4: 20份汽油+2份丙酮+2份石油醚+1份苯
丙酮。
叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下:
(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。
(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。
(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。
(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。
(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。
(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。
(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。
(8)将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。
1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液
A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精 毫升
B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液
A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升
B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升
将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)
A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升
B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升
将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用):碘 1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水 300毫升
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克 蒸馏水 100毫升
6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水 100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水 100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液 :刚果红(Congo red) 2.0 克蒸馏水100ml
9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水 95.0
10、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸 10.0克 甘油 20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升 棉蓝 0.02克蒸馏水 10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
11动物组织石蜡切片染色方法
苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min,入伊红染液染色10 min;入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片.
一、常用染色液的配制
⒈ 碘-碘化钾(I2-KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方:碘化钾2g ; 蒸馏水300ml ; 碘1g
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。
⒉. 苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ) 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。
配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入10ml甘油
(2)先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。
⒊. 1%醋酸洋红(aceto carmine): 酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。
配方:洋红1g ; 45%醋酸100ml
煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。
⒋ 改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine): 核染色剂。
配制步骤: 先配成三种原液,再配成染色液。
原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。
原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。
(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)
染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~1.8g,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。
适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。[/sell]
⒌ 中性红(neutral red)溶液 :用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。
配方:中性红0.1g ; 蒸馏水100ml
使用时再稀释10倍左右。
⒍ 曙红Y(伊红,eosin Y)酒精溶液 常与苏木精对染,能使细胞质染成浅红色,起衬染作用。
配方:曙红0.25g ; 95%酒清100ml
也常用于95%酒精脱水时,加入少量曙红溶液,其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。
⒎ 钌红(ruthenium red)染液 钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。
配方:钌红5~10mg ; 蒸馏水25-50ml
⒏ 龙胆紫(gentian violet) 为酸性染料,适用于细菌涂抹制片。
配方:龙胆紫0.2~1 g ; 蒸馏水100ml
⒐ 苯胺兰(aniline blue)溶液 :为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色,对于高等植物多用于与番红作双重染色。
配方:苯胺兰1 g ; 35%或95%酒精100ml
⒑ 间苯三酚(phloroglucin)溶液 用于测定木质素。
配方:间苯三酚5g ; 95%酒精100ml
注:此溶液呈黄褐色即失效。
⒒ 橘红G(orange G)酒精溶液 为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。
配方:橘红G 1g ; 95%酒精100ml
⒓ 番红(safranin O) 为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。
配方:(1)番红水溶液 番红0.1或1 g ;蒸馏水100ml
(2)番红酒精溶液 番红0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml
(3)苯胺番红酒精染色液
甲液 番红5 g +95%酒精50ml
乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml
将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀,过滤后使用。
⒔ 固绿(fast green) 又称快绿溶液。为酸性染料,能将细胞质,纤维素细胞壁染成鲜艳绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。
配方:(1)固绿酒精液 固绿0.1 g ; 95%酒精100ml
(2)苯胺固绿酒精液 固绿 1 g ;无水酒精 100ml ;苯胺油 4ml
配后充分摇匀,过滤后使用。现配现用效果好。
⒕ 苏木精(hematoxylin)染液 苏木精是植物组织制片中应用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料,而且可以分化出不同颜色。配方很多,现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。
配方:甲液(媒染剂): 硫酸铁铵(铁明矾)2-4g ;蒸馏水100ml
(必须保持新鲜,最好临用之前配制)
乙液(染色剂):苏木精 0.5-1g ;95%酒精 10ml;蒸馏水 90ml
配制步骤:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长期保存。
切片需先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
⒖亚甲基蓝染液 常用于细菌、活体细胞等的染色。
取0.1g亚甲基蓝,溶于100ml蒸馏水中即成。
⒗詹纳斯绿B(Janus green B)染液
将5.18gJanus 绿溶于100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。
⒘硫堇染液
取0.25克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。使用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反应。
18.黑色素液
水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛(福尔马林)0.5mL。可用作荚膜的背景染色。
19.墨汁染色液 :国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。用作荚膜的背景染色。
20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液
A液:美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝)0.3g,95%乙醇30mL;
B液:0.01%KOH100mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。
21.革兰氏染色液
(1)结晶紫(cristal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)芦戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL,即成。配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色 能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸馏水90mL。
(5)番红溶液:番红O(safranine O,又称沙黄O)2.5g,95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染色液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌,前者蓝紫色,后者淡红色。
22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液:碱性复红0.3g溶于95%乙醇10mL中为A液;0.01%KOH溶液100mL为B液。混合A、B液即成。
23.姬姆萨(Giemsa)染液
提取蛋白质测定还原力的作用(提取蛋白质测定还原力的作用是)井藤汉方胶原蛋白很好,它可以养颜护肤、提高免疫力,胶原蛋白肽是动物结缔组织的提取物。蛋白质、氨基酸等营养物质丰富,经常食用有修复机体皮肤细胞的作用,起到恢复肌肤弹性、恢复肌肤光泽、延缓衰老、润泽发质的作用。
白蛋白是在血清提取物,属于血制品。白蛋白是人体必须的重要的蛋白质,对于人体细胞的代谢,胶体渗透压起到非常重要的作用。正常情况下,人体的蛋白由肝脏合成。提取人血白蛋白,是在正常健康人群的血液提炼出来的为临床应用。健康的人体,通过摄入适当的含有蛋白比较高的食物,通过肝脏合成,足够人体的需求,不需要进行白蛋白的血制品的应用。
盐析和变性都会让蛋白质沉淀,但是盐析的条件控制好就不会使蛋白质失去活性,除去溶液中的中性盐就可以重新溶解。
蛋白质变性的那就失去了生物活性,三维结构被破坏,某些情况下可以通过复性再次恢复活性,但是目前能够复性的蛋白质是非常少的,条件要求也各不相同。关于盐析和变性的原理,一般情况下我们认为盐析剥夺了蛋白质的水化层并且破坏了它的表面电荷平衡,变性的情况就比较多了,总的来说是让蛋白质本身精巧的结构被破坏,从而让蛋白质失去活性。
可溶性糖包括绝大部分的单糖、寡糖。它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。
而还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。还原性糖主要有葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。
两者为不同类型的糖类,所指含义不同,作用也不一样。
三聚氰胺(Melamine),俗称密胺、蛋白精,常温下很稳定,没有还原性。
蛋白质变性是指天然蛋白质分子受到某些物理或化学因素的影响时,次级键被破坏,天然构象解体,生物火性丧失,理化性质也随之改变. 蛋白质变性后也有可能在去掉变性条件后,恢复到原来的构象,其理化性质也得到恢复的现象成为蛋白质复性. 蛋白质的高级结构都是有非共价键连接的,即范得华力,疏水作用力等,所以在受到物理化学因素影响时容易断裂,导致蛋白质的高级结构不稳定
可溶性糖包括绝大部分的单糖、寡糖。它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。
而还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。还原性糖主要有葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。
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