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常见的细菌染色方法及作用(细菌最常用的染色方法)原理：革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。
步骤：
(一)涂片固定
在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水，用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。
(二)染色
在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液，染色液应完全覆盖整个菌膜，染色1min。
(三)水洗
染色到一定的时间，拿住玻片使之成450角，用细小的水流把多余的染料冲洗掉，被菌体吸附的染料则保留。
(四)媒染
加碘液覆盖涂面染1 min。在媒染处理时，媒染剂与染料形成不溶性的化合物，可增加染料和细菌的亲和力。
(五)水洗，用吸水纸吸去水分
用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。
(六)脱色
加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色， 20 s~30 s后再进行水洗，吸去水分。
(七)复染
蕃红染色液染色10 s后， 自来水冲洗。
(八)干燥，镜检
染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
扩展资料
标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
(1)杀死微生物，固定细胞结构。
(2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上，防止标本水洗时被水冲洗掉。
(3)改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
革兰氏染色（Gram Staining）是用来鉴别细菌的一种方法：这一染色方法由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系，后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一，对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。
检验常用染色法包括1）革兰氏染色法2）抗酸染色法3）美兰染色法4）异染颗粒染色法5）细菌鞭毛染色法6）荚膜染色法芽孢染色法7)布氏杆菌科兹洛夫斯基染色法8)结核杆菌荧光染色法等主要染色法革兰氏染色法染液配制1。结晶紫染液：称取结晶紫（龙胆紫）14g，溶于95%酒精100ml中，配成饱和液，再取饱和液20ml与1%草酸铵溶液（1g草酸铵溶于100ml蒸馏水溶解即成）80ml混匀即成2。卢戈氏碘液：碘化钾2g于10ml蒸馏水中，再加碘1g，待碘全部溶解后（时间较长）加蒸馏水200ml即成3。95%酒精4。（1）石碳酸复红液：称取碱性复红（碱性品红）4g溶于95%酒精100ml中成饱和液，再取饱和液10ml与5%石碳酸溶液（5ml石碳酸溶于100ml蒸馏水）90ml混匀即成，（2）稀释石碳酸复红液：取石碳酸复红液10ml加入蒸馏水90ml即成染色方法：
1。涂片将菌液直接涂在载玻片上，经培养的菌落要加生理盐水混匀涂片，等待干燥（固定）
2。将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上，染色1分钟后用水冲去剩余燃料3。滴加卢戈氏碘液1分钟后水洗，在滴加95%酒精脱色，摇动玻片至紫色不在脱色为止（约需1分钟），水洗4。用稀释石碳酸复红液复染30秒至1分钟5。水洗待干，镜检6。革兰氏阳性菌染成紫色，革兰氏阴性菌染成红色
光学显微镜观察染色体可以用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染色剂进行染色。
常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤，然后用显微镜甚至油镜观察。
细菌用革兰氏染色就可以了（某些特殊的细菌可以用其他染色法）先用接种环在酒精灯上灼烧灭菌，然后伸入液体培养基中降温，并挑取一环在玻片上待其自然干燥。如果含菌量太大，可以用生理盐水稀释。之后在火焰上略微加热固定，后面的就和一般的革兰氏染色方法相同了。
革兰氏染色法的原理是通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙。
因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差。
在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
扩展资料：
一、方法概述
细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G－）。
为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红、稀释复红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数的球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
二、常见种类
常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌（Staphylococcus）、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。
常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等。
简单染色方法:涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检
简单染色流程 (1)涂片：取一块干净的载玻片,并在其中央滴一小滴生理盐水(或无菌蒸馏水)。接种环在酒精灯上杀菌后从斜面挑取少量菌种(金黄色葡萄球菌或枯草杆菌)与玻片上的水滴混匀后,涂布成一均匀的薄层。涂布面一般以直径1cm大小范围为宜。
(2)干燥与固定：涂片最好在室温下使其自然干燥。亦可在酒精灯上微微加热,加速水分蒸发,但切勿过热。固定时,在酒精灯火焰外层尽快地来回通过2~3次,多为2~3s,以载玻片背面不觉烫手为宜,放置待冷后,进行染色。
(3)染色：在涂片上滴染色液一滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
(4)水洗：斜置载玻片,在来自水龙头下用小股水线冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
常见的绿叶菜,3种绿叶蔬菜堪称“救命菜” 应该多吃绿叶蔬菜有很多神奇的功效，每天至少要食用3盎司～5盎司(85克～142克)。美国《赫芬顿邮报》刊文指出，以下3种绿叶蔬菜，堪称“救命菜”，应该多吃。
餐桌三种廉价救命菜
小白菜
小白菜又称上海青或油白菜。小白菜是钾元素的一个最佳，而钾元素有助于增长肌肉和保持血压处于正常水平。它还富含多种维生素，能增强免疫系统功能，增加白细胞的活性和提高人体对毒素所产生的反应。
食用方法：把小白菜茎下端的白色部分切碎，用鸡肉或蔬菜汤和芝麻油炖焖;2分钟后加入小白菜的叶子，再煮2分钟就可食用。
甘蓝菜
甘蓝菜含有能对癌症起到控制作用的化合物(芥子油甙和山柰酚)。研究人员认为，这两种化合物能抵御癌症，对心脏起到保护作用，降低血压，增强骨骼力量和减轻人体内的炎症。甘蓝菜还富含叶黄素和玉米黄质，这两种抗氧化剂有助于预防眼部疾病和与老化相关的视力丧失。
食用方法：把甘蓝菜和切碎的洋葱用旺火短时间煸炒。
豆瓣菜
豆瓣菜又称西洋菜或水田芥。一把豆瓣菜就能满足人体每日对维生素K的推荐摄入量。如果能坚持每天都食用豆瓣菜，持续两个月，就能减轻白细胞所受到的损伤，减少患癌症的风险，使甘油三酯的含量降低10%。
延伸阅读：教你“吃果蔬前最该做的几件事
削
红薯、土豆、荸荠、白果等果蔬的表皮可能含有害物质或者致病菌，因此吃前最好先削皮。如果担心苹果、梨等水果有农残风险，但又想获得果皮的营养，可以在认真清洗过这类水果后，削掉果柄和蒂处这两个地方，因为一般来说，水果两端凹进去的部分是农药残留最多的位置。小叶的菠菜、茼蒿、鸡毛菜、小白菜、油麦菜等绿叶菜，可以将根切除，先放在水里抖动清洗后，再用流水冲洗。
冲
对于那些不能削皮的水果如葡萄、草莓、杨梅、桑葚、蓝莓、樱桃、红提、李子、山楂、杏等可通过用流水冲洗的方法去除表面的微生物、农药残留以及泥沙。包叶类蔬菜如卷心菜、生菜、大白菜等，可将外围的叶片去掉，采用冲洗的方法进行洗涤。
刷
猕猴桃、桃子等水果因浑身长有毛刺，在清洗之前，可先用小刷子将毛刺刷掉，再用流水冲洗干净，不然毛刺很容易粘到果肉上。对于黄瓜、青椒、胡萝卜、苦瓜、南瓜等，可以用柔软的刷子刷洗后冲洗干净即可。
焯
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