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培养基中乙酸钠的作用(培养基中碳酸氢钠的作用)DMEM/F12培养基说明书
产品代号：MD207-050
一．【组成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042
五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1
七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081
氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55
氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035
无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24
氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98
无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65
磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02
L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2
L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031
L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219
甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17
L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68
二．【产品指标】
外观 粉红色固体粉末
溶解性 完全溶解，溶液澄明。
pH值
①加NaHCO3 6.60～7.20
②不加NaHCO3 5.50～6.10
水分（%） ≤5.0
渗透压（mOsm/kgH2O）
①加NaHCO3 274～302
②不加NaHCO3 238～263
细菌内毒素（EU/ml） ≤10
微生物检查（CFU/g） ≤1000
细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似
细胞数量 加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
三.【配制方法】
⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升，轻微搅拌溶解。
⑵ 加入2.438克碳酸氢钠。
⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至1升。
⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。
⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌。
⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存。
四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏。
乙酸钠的BOD5当量为0.52(mgBOD/mg 。乙酸钠一般以带有三个结晶水的三水合乙酸钠形式存在。三水合乙酸钠为无色透明或白色颗粒结晶，在空气中可被风化，可燃。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。123℃时失去结晶水。但是通常湿法制取的有醋酸的味道。水中发生水解。可用于作缓冲剂、媒染剂，用于铅铜镍铁的测定，培养基配制，有机合成，影片洗印等。
碳酸钙，又叫白垩，或石灰石粉，是一种用石灰石加工磨碎的白色固体粉末，呈弱碱性，其性质稳定，但不具消毒能力。
碳酸钙不溶于水，但如果水中有较多的二氧化碳，则能使其溶解，生成可溶性的碳酸氢钙。
食用菌菌丝体在含水的基质中生长，并不断排出二氧化碳，而二氧化碳又为碳酸钙所吸收生成碳酸氢钙，从而就能不断地为食用菌提供钙质营养。 碳酸钙除补充钙素外还能中和菌丝生长时产生的有机酸，使培养料的pH不致下降过低，其用量一般为培养料干重的1%~2%。
市售碳酸钙分重质碳酸钙（机械磨碎加工品）和轻质碳酸钙（化学粉碎加工品）两种，均可使用。碳酸钙如果短缺，也可用石灰或石膏粉代替。
二氧化碳培养法
某些细菌需要在含有10%二氧化碳的空气中 才能生长，尤其是初代分离培养要求更为严格。将 已接种的培养基置于二氧化碳环境中进行培养的方 法即二氧化碳培养法
基本内容
某些细菌需在一定浓度CO 2存在的条件下才能生长或生长良好，如脑膜炎球菌、弯曲菌等。将已接种标本的培养基放入CO 2环境中进行培养的方法，即二氧化碳培养法。
方法步骤(1)二氧化碳培养箱可将已接种的培养基直 接放入箱内孵育，即可获得二氧化碳环境。(2)烛缸法： 将已接种的培养基，置于容量为 2000ml的磨口标本缸或干燥器内。缸盖或缸口处 均需涂以凡士林，然后点燃蜡烛直立置入缸中，密 封缸盖，待火焰自行熄灭时，容器内约含5%～ 10%的CO 2，将其置37℃培养。(3)重碳酸钠一盐酸法 每升容积的容器内， 重碳酸钠与盐酸按0.4g与3.5ml的比例，分别将 两种药各置一器皿内(如平皿内)，连同器皿置于标 本缸或干燥器内，盖严后使容器倾斜，两种药品接 触后即可产生二氧化碳。
注意事项1.烛缸法中的蜡烛熄灭是因为氧气减少，但不是没有氧气，因此不能误认为是厌氧培养法。2.用作CO 2培养之玻缸因多次连续使用或培养时间较长，内中有凝结水。由于湿度较大有造成丝状真菌污染的可能，故应经常作清洁处理。
NA培养基又称为营养琼脂培养基。
主要用于一般细菌的培养，转种，复壮等。
标准配方如下：
蛋白胨10.0g，牛肉粉3.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g
将以上原料溶于1000毫升纯水中，以盐酸或氢氧化钠调整溶液PH为7.3，保存条件为25℃避光保存，有效期为180天。
在使用前，将培养基取出，在121℃高压灭菌15分钟后再进行使用。
(l)培养池的建造要求:培养池应建在水质好、光照条件适宜，场地开阔的地方，可采取环道形的水泥池，池深0.5米左右，池宽8-10米,池长50米以上为宜。沿池的长度方向在池中间将池隔开，以利于池水旋转。
(2)水质和光照要求:水源可用经暴晒的井水或自来水河水需经药物处理。pH值在8.5-10之间为宜.池水深度宜保持在0.2-0.3米之间，水温在18-355℃之间,光照强的培养池可采用遮荫物调节，光照太弱用叶轮式增氧机搅拌，使上下层藻丝皆得到均匀的光照。
(3)技术措施及培养液的配制:碳酸氢钠4-8克升,尿素0.1-0.15克/升，硝酸钠1.5克/升,过磷酸钙0.5-1.0克/升磷酸二氢钾0.3-0.5克/升，氯化钾0.5-1.0克/升，硫酸钾1.0克/升，食盐0.5克/升，硫酸镁0.01克／升，硫酸亚铁0.005克/升。在连续培养过程中需适时添加营养盐。起始培养液中碳酸氢钠浓度应增加到8-10克/升,添补尿素宜少量多次。
当你观察藻类时，螺旋线好能正常伸展.如果弯曲、结团和下沉，主要是氨中毒，则应添加或不添加尿素。其次，看看藻类液体的颜色。蓝绿色正常，黄绿色表示没有氮肥.第三，看看气候。多云多雨，气温低，光线微弱.藻类生长缓慢.少量施肥或推迟施肥。定期监测养分以施肥促进营养成分。
合成培养基也是要调节ph的，因为因为不同微生物所需环境的PH不同, 同时在培养基培养是可能加入特殊的促进剂或抑制剂 都会使得培养基PH变化，而且是微生物的生长过程中由于营养物质的分解、代谢产物的积累,培养基的PH也会发生改变,故培养基在配置时以及在微生物培养过程中都需要调节PH.
配制DMEM培养基正常血清没有过滤，双抗体不需要过滤，可添加在前面（如果需要的话，除非双反）培养基的罕见的内容，否则就不需要在零下20摄氏度保存，培养两周跑出去不在4存储任何问题。另外，我不同意与冷冻细胞明显高于血清，没有根据。在ATCC细胞冻存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是常用的。冻存存活率极高的细胞。（当然，冷冻也是非常重要的存储过程）
配制DMEM培养基时血清不必要过滤，但我认为双反应进行过滤，毕竟，是不是很麻烦。同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题，重要的是冷冻程序，如离心速度不太大，有二甲基亚砜的量不能超过10%，这是非常重要的。
配制DMEM培养基除了DMEM粉末直接加入，也应按照说明书添加碳酸氢钠适量，它是关于2G，pH值可能远大于你所需要的pH值，再加入适量HEPES，约2.38g，pH满意度，根据需要添加双抗，过滤，分装。如果数量不多，储存超过20度，必要时添加血清，血清是不需要消毒，因为合格血清已达到无菌的条件下，摇它
r2a培养基原理如下：
1、r2a培养基可以修复被氯气损伤的细菌，支持耐受氯气的微生物的生长。
培养基中加入琼脂作用(培养基加入琼脂的目的)1、琼脂快可以吸收生长素，具有凝固性、稳定性，在试验中为植物提供生长素；
2、琼脂不提供其他营养元素以干扰试验，而且其中的生长素只上下运动，不会横向运动，这样试验就不会受到光照的影响；
3、铁块恐怕不能吸收生长素吧？
4、木块、海绵倒是可以吸收，但也容易挥发，而且不能保证里面还有的生长素是均匀的，里面生长素不会定向移动，容易受外界环境影响，如重力、光照等。
琼脂培养基就是固体培养基，培养基中加入琼脂目的是为了使培养基凝固。
对于琼脂来说，其凝固需要一定的pH范围，一般为从4-10，但由于常用的培养基中含有比较复杂的有机无机成分，这对琼脂交联有影响，改变了琼脂可以承受的pH范围，因此有些培养基凝固需要特定的pH。
1.加热器功率不能太高，也不能太低。
太高，容易沸腾和把培养基烧焦；太低，培养基容易凝固。
2.受热要均匀，可以垫上石棉网，要用玻璃棒不停缓慢搅拌。
3.加热完毕后，要在合适的温度（60℃左右）倒平板，防止凝固。
（3）灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右，可置于47-50℃水浴保温（可根据实际培养基凝固温度适当提高水浴温度），放置时间一般不应超过4小时；
（4）临用前，加入相应的添加剂成分，摇匀后倾入平板，凝固后备用；或制成斜面、倾注使用等。
加入琼脂的固体培养基与液体培养基相比优点在于操作简便，通气问题易于解决，便于经常观察研究等。
在培养基中，琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基或半固体培养基。加入琼脂的固体培养基与液体培养基相比优点在于操作简便，通气问题易于解决，便于经常观察研究等。并且琼脂的稳定性良好。
琼脂,学名琼胶,英文名agar,又名洋菜、冻粉、燕菜精、洋粉、寒天。琼脂在食品工业的应用中具有一种极其有用的独特性质。其特点：具有凝固性、稳定性，能与一些物质形成络合物等物理化学性质，可用作增稠剂、凝固剂、悬浮剂、乳化剂、保鲜剂和稳定剂。
广泛用于制造粒粒橙及各种饮料、果冻、冰淇淋、糕点、软糖、罐头、肉制品、八宝粥、银耳燕窝、羹类食品、凉拌食品等等。
琼脂在化学工业、医学科研、可作培养基、药膏基及其他用途。原料：江蓠、紫菜、石花菜作用：琼脂具有凝固性、稳定性，可用作增稠剂，凝固剂，悬浮剂，乳化剂、稳定剂、保鲜剂、粘合剂、和生物培养基。用途：琼脂广泛用于制造粒粒饮料、米酒饮料、果汁饮料、水晶软糖、羊羹、午餐肉、火腿肠、果冻布丁、冰淇淋、裱花蛋糕、八宝粥、凉拌菜等等。
培养基中加双抗作用(培养基双抗怎么加)配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3，双抗体可以添加，也可以不加，能加入浆液过滤，在好的或，见细胞和血清浓度，不同，不同的细胞需要的同时，冻存细胞需要培养基血清含量较高，一般为20%-30%。此外，包装后的培养基和血清过滤，除了被用于一瓶，其他存储在-20度，或一部分，如谷氨酰胺易降解。
配制DMEM培养基可以先用后的体积是2/3的水溶解配制，包装袋也需要清洗。2G完全溶解的碳酸氢钠此外，加双抗后，定容至终体积。过滤到零下20摄氏度保存。添加血清的时候。
根据我的经验，配制DMEM培养基正常血清没有过滤，双抗体不需要过滤，可添加在前面（如果需要的话，除非双反）培养基的罕见的内容，否则就不需要在零下20摄氏度保存，培养两周跑出去不在4存储任何问题。另外，我不同意与冷冻细胞明显高于血清，没有根据。在ATCC细胞冻存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是常用的。冻存存活率极高的细胞。（当然，冷冻也是非常重要的存储过程）
配制DMEM培养基时血清不必要过滤，但我认为双反应进行过滤，毕竟，是不是很麻烦。同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题，重要的是冷冻程序，如离心速度不太大，有二甲基亚砜的量不能超过10%，这是非常重要的。
培养全能干细胞的培养基是什么动物细胞培养液：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆.植物组织培养液的成分：水、无机盐、蔗糖、植物激素（生长素,细胞分裂素）等.干细胞对培养条件要求较高,常用的胚胎肝细胞培养基有mTeSR 1培养基,主要成分有：DMEM、bFGF,EGF、血清、双抗、LIF、谷氨酰胺、二巯基乙醇、非必需氨基酸等。干细胞相关的培养液都必须在5％CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。一般情况下，细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。
培养液:用含10%胎牛血清的DMEM培养基，PH值7.2－7.4，新鲜配制的不用加谷氨酰胺，超过2周后加入1ML／100ML培养基。
如果长得不好,可以提高胎牛血清的浓度到20%左右,培养瓶最好用添加EGF的明胶或胶原裱衬，浓度一般是1－3mg/ml,不用也行,有的人也添加VEGF，浓度一般是10-50ng/ml,常规加碳酸氢钠和双抗。
在37℃、体积分数5%CO2的条件下培养.细胞贴壁生长，胰酶每2～4d传代1次.也有用M199培养基的.其他一样.（仅供参考）
1.提前一天将分装好的FBS从—20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化冻；
2.在细胞间中将FBS以及其它需要添加的成分（如，丙酮酸钠、抗生素等），按照比例加入DMEM培养基中，作好标签；放入4℃冰箱保存。
配制比例如下：
DMEM（High glucose）/ DMEM培养基（高糖）
谷氨酰胺
50ul
非必需氨基酸
500ul
丙酮酸钠
500ul
B-巯基乙醇
双抗
50ul
血清
7.5ml
LIF
5ul
二、ES细胞培养基
DMEM+15%FBS
2-巯基乙醇
5.5uM
1000X
L-谷氨酰胺
2mM
100X
LIF
1000U/mL
10000X
非必需氨基酸
100uM
100X
双抗
100X
配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3，双抗体可以添加，也可以不加，Z好能加入浆液过滤，在好的或，见细胞和血清浓度，不同，不同的细胞需要的同时，冻存细胞需要培养基血清含量较高，一般为20%-30%。此外，包装后的培养基和血清过滤，除了被用于一瓶，其他存储在-20度，或一部分，如谷氨酰胺易降解。
配制DMEM培养基可以先用Z后的体积是2/3的水溶解配制，包装袋也需要清洗。2G完全溶解的碳酸氢钠此外，加双抗后，定容至终体积。过滤到零下20摄氏度保存。添加血清的时候。
根据我的经验，配制DMEM培养基正常血清没有过滤，双抗体不需要过滤，可添加在前面（如果需要的话，除非双反）培养基的罕见的内容，否则就不需要在零下20摄氏度保存，培养两周跑出去不在4存储任何问题。另外，我不同意与冷冻细胞明显高于血清，没有根据。在ATCC细胞冻存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是Z常用的。冻存存活率极高的细胞。（当然，冷冻也是非常重要的存储过程）
配制DMEM培养基时血清不必要过滤，但我认为双反应进行过滤，毕竟，是不是很麻烦。同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题，Z重要的是冷冻程序，如离心速度不太大，有二甲基亚砜的量不能超过10%，这是非常重要的。
配制DMEM培养基除了DMEM粉末直接加入，也应按照说明书添加碳酸氢钠适量，它是关于2G，pH值可能远大于你所需要的pH值，再加入适量HEPES，约2.38g，pH满意度，根据需要添加双抗，过滤，分装。如果数量不多，储存超过20度，必要时添加血清，血清是不需要消毒，因为合格血清已达到无菌的条件下，摇它
动物细胞体外培养条件：37℃，5%二氧化碳培养箱中培养。培养基：1640、DMEM、F12等培养基，一般用含10%胎牛血清或小牛血清的培养基培养，培养时加上双抗。
固体培养基的配置中，琼脂的比例在15%~20%均可。
琼脂粉一般加15g，以下为LB固体培养基的配置方法 LB固体培养基，倒制时培养基温度不宜过高，否则冷却后平板会产生大量冷凝水。LB(Luria-Bertani)固体培养基 在950ml ddH2O中加入 胰化蛋白胨（tryptone） 10g; 酵母提取物（yesat extract）5g; NaCl 10g。用1M的NaOH调节pH值到7.0，定容至1L。然后加入15g琼脂粉。121℃，20min高压灭菌，待冷却至50-60℃时，倒制平板。倒制时培养基温度不宜过高，否则冷却后平板会产生大量冷凝水。
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培养基中加双抗作用是什么(培养基里加的双抗是什么)培养全能干细胞的培养基是什么动物细胞培养液：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆.植物组织培养液的成分：水、无机盐、蔗糖、植物激素（生长素,细胞分裂素）等.干细胞对培养条件要求较高,常用的胚胎肝细胞培养基有mTeSR 1培养基,主要成分有：DMEM、bFGF,EGF、血清、双抗、LIF、谷氨酰胺、二巯基乙醇、非必需氨基酸等。干细胞相关的培养液都必须在5％CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一，所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环，产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。一般情况下，细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。
以gibco的青霉素链霉素溶液（100x）为例（货号：15140163），含10000IU/ml青霉素，10000ug/ml链霉素，即工作浓度（1x）青霉素、链霉素用量分别为100IU/ml和100ug/ml
ZYM-DIEC02(猪小肠上皮细胞)资料信息介绍：
产品名称：ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞
型号：HTX1944
生长特性：贴壁
组织来源：猪小肠上皮细胞
培养基：89%1640+10%FBS+1%双抗
物种：猪
规格：2X10^6 cells
培养温度：37℃
引种来源：ATCC、DSMZ、ECACC、sciencell
传代：1：2~1：4传代，两天左右换液。
冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）。
包装：专业的无菌保温运输包装。
如需ZYM-DIEC02(猪小肠上皮细胞)详细资料、照片及细胞培养操作说明欢迎联系。
细胞发货方式：
复苏后发货：细胞复苏后发货，一周左右到货，免运输费用（气温较好建议用复苏后发货的方式）。
冻存发货：需加干冰运输费用，选择干冰运输的发两管细胞，每管细胞数量2X10^6 cells，货期2-3天（气温低于0℃须冻存发货）。
细胞发货采用专业的包装，用最快捷的空运快递运输方式免费送货上门。
配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3，双抗体可以添加，也可以不加，Z好能加入浆液过滤，在好的或，见细胞和血清浓度，不同，不同的细胞需要的同时，冻存细胞需要培养基血清含量较高，一般为20%-30%。此外，包装后的培养基和血清过滤，除了被用于一瓶，其他存储在-20度，或一部分，如谷氨酰胺易降解。
配制DMEM培养基可以先用Z后的体积是2/3的水溶解配制，包装袋也需要清洗。2G完全溶解的碳酸氢钠此外，加双抗后，定容至终体积。过滤到零下20摄氏度保存。添加血清的时候。
根据我的经验，配制DMEM培养基正常血清没有过滤，双抗体不需要过滤，可添加在前面（如果需要的话，除非双反）培养基的罕见的内容，否则就不需要在零下20摄氏度保存，培养两周跑出去不在4存储任何问题。另外，我不同意与冷冻细胞明显高于血清，没有根据。在ATCC细胞冻存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是Z常用的。冻存存活率极高的细胞。（当然，冷冻也是非常重要的存储过程）
配制DMEM培养基时血清不必要过滤，但我认为双反应进行过滤，毕竟，是不是很麻烦。同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题，Z重要的是冷冻程序，如离心速度不太大，有二甲基亚砜的量不能超过10%，这是非常重要的。
配制DMEM培养基除了DMEM粉末直接加入，也应按照说明书添加碳酸氢钠适量，它是关于2G，pH值可能远大于你所需要的pH值，再加入适量HEPES，约2.38g，pH满意度，根据需要添加双抗，过滤，分装。如果数量不多，储存超过20度，必要时添加血清，血清是不需要消毒，因为合格血清已达到无菌的条件下，摇它
动物细胞体外培养条件：37℃，5%二氧化碳培养箱中培养。培养基：1640、DMEM、F12等培养基，一般用含10%胎牛血清或小牛血清的培养基培养，培养时加上双抗。
1.提前一天将分装好的FBS从—20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化冻；
2.在细胞间中将FBS以及其它需要添加的成分（如，丙酮酸钠、抗生素等），按照比例加入DMEM培养基中，作好标签；放入4℃冰箱保存。
配制比例如下：
DMEM（High glucose）/ DMEM培养基（高糖）
谷氨酰胺
50ul
非必需氨基酸
500ul
丙酮酸钠
500ul
B-巯基乙醇
双抗
50ul
血清
7.5ml
LIF
5ul
二、ES细胞培养基
DMEM+15%FBS
2-巯基乙醇
5.5uM
1000X
L-谷氨酰胺
2mM
100X
LIF
1000U/mL
10000X
非必需氨基酸
100uM
100X
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