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中水的作用(怎样选择流动相,流动相中水的作用)(中汇糖脉康)

来源:http://1zy.cn/ 作者:http://1zy.cn/ 发表于:2023-05-07 21:52:54 人围观在线客服在线客服

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在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值,随其极性的增加而增大,但随流动相中极性调节剂的极性增大(或浓度增大)而降低。同时,极性键合相的极性越大,组分的保留值越大。

该法主要用于分离异构体,极性不同的化合物,特别是用来分离不同类型的化合物。

反相键合相色谱法

在反相色谱中,一般采用非极性键合固定相,如硅胶-C18H37(简称ODS或C18)硅胶-苯基等,用强极性的溶剂为流动相,如甲醇/水,乙腈/水,水和无机盐的缓冲液等。

目前,对于反相色谱的保留机制还没有一致的看法,大致有两种观点:一种认为属于分配色谱,另一种认为属于吸附色谱。

一般流动相在上仪器前必须经过两个步骤:减压抽滤和超声减压抽滤有两个目的,一个是过滤掉气体,尤其是有机相和水相混合的时候,会产生大量的气泡。这些气泡进入仪器就会堵住仪器和色谱柱,所以要除掉。

一个是过滤掉不溶性微粒。

你看一般的过滤膜是4.5um孔径的,这个是针对你的色谱柱而定的。色谱柱一般是5um的粒径,保证过滤的流动相里面小的毛絮啊,颗粒啊都不会进入色谱柱。

超声的主要目的也是为了脱气,另外还有助溶和令溶液混合均匀等作用。

不过超声主要是为了去掉溶剂瓶瓶壁和瓶底的气泡,所以没必要超声太久的时间,3-5min足够了。

总而言之,都是为了保护仪器和色谱柱,防止气泡和杂质进入。

某些物质在酸碱性环境中会更稳定,出峰效果更高。

酸性环境就加醋酸调。碱性就加氨水

没什么特别大的区别,外观一致。实际抽滤一下吧,用一点纯甲醇,水膜瞬间化掉,有机膜完好。如果两个同时抽滤纯水相,水膜过滤速度会快一些。

当选用最佳流速时,分析时间可能延长可以更好的得到分离效果。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。

梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗提。 在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。 梯度洗脱的优点:

1.缩短分析周期;

2.提高分离能力;

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标签:流动   作用

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