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本文导读目录：

1、牛黄 珍珠

2、牛黄

3、牛黄上清丸 《全国中药成药处方集》(天津方)

牛黄 珍珠 ♂

牛黄 珍珠   2.牛黄 珍珠 : 【中医理论】
牛黄苦寒,清热解毒力甚,有清心定惊,豁痰开窍之功。珍珠咸而寒,除镇心定惊外,还有清热、祛痰、解毒作用。二药合用,加强清热解毒、定惊息风、豁痰开窍之力。一般牛黄用0.2～0.5g,入丸散。珍珠0.3～1g,入丸散。
【化学研究】
取人工牛黄30g,珍珠50g等研细制成珠黄散。
1.牛黄的薄层鉴别^[1]取本品5g,加乙醇20ml,搅拌5min,倾取乙醇液,置水浴上蒸干,残渣加乙醇1ml制成含2mg的溶液,作为对照品溶液。吸取上述溶液各5μl,分别点于同一块硅胶G板上,以异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水(10:5:5:3:1)上层液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以磷钼酸试液,在105℃烘5min。结果,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同的颜色斑点。
2.珍珠的鉴别^[1]
取本品2g,置具塞试管中,加氯仿10ml,振摇使基质溶解。静置,倾去上层液,取残渣置显微镜下观察。不规则碎块半透明,有光泽,具颗粒性,有的可见细密波状纹理。
3.胆红素的定量分析^[2]
测定条件的选择:取珠黄散适量,加氯仿使溶解,滤过,弃去初滤液,分取续滤液。用UV-250可见-紫外分光光度计,在350-500nm波长范围内扫描。结果表明供试品在453±1nm波长处有最大吸收,故选用吸收波长453±1nm。胆红素回归方程为:A=0.1955C-0.001524。r=0.9999。可见:胆红素在0.2～1.0μg间,胆红素的量与吸收度之间呈线性关系。
回收率试验,取空白供试品适量,准确加入一定量的人工牛黄,加氯仿振摇15min,使溶解,氯仿定溶,放置15min,滤过,弃去初滤液,续滤液在453±1nm波长测定吸收度。按胆红素C33H36O6N4的吸收系数(E1%1cm)为1038计算,结果见表11-2-1。
样品测定:准确称取供试品适量(约相当于人工牛黄80mg),加氯仿适量,振摇使溶解,按回收试验的测定方法操作,结果见表11-2-2。

表11-2-1 回收率试验

表11-2-2 牛黄珍珠胶囊中胆红素含量

【药理研究】
1.镇静作用^[3]
1.1 对小鼠外观行为活动的影响
以小儿热必清(牛黄、珍珠、冰片等组成)为试验样品。取雄性活泼、反应敏捷的小鼠24只,体重18g左右,随机分为3组。服热必清0.58g/kg,服速效感冒丸0.58g/kg,对照组服等容积的生理盐水。服生理盐水组的小鼠,行为活动无明显变化。速效感冒丸组亦未见抑制作用,给小儿热必清药后,动物跑动,攀笼活动开始减少,小鼠多聚堆,闭目,倦卧笼底,活动次数减少,表明动物处于抑制状态。但对外界给予的刺激仍有反应。
1.2 对小鼠自发活动和阈下剂量戊巴比妥钠作用的影响
小鼠分热必清,速效感冒丸和生理盐水3大组,每大组又分5个实验小组,每组3只。服药剂量同上,给药30min后用GJ-7902型E光道小鼠活动记数仪,同时测定小鼠10min内活动次数并以翻正反射消失作用为小鼠睡眠指标,结果见表11-2-3。

表11-2-3 热必清对小鼠自发活动和戊巴比妥钠的影响

从表11-2-3中可以看出,热必清有较好的镇静作用。速效感冒丸未见有镇静作用。
2.镇痛作用^[3]
热板法:取18g左右的雌性小鼠21只,随机分为3组,每组7只,控制测痛板恒温于55℃,以小鼠舔后肢作为痛反应指标。给药前测痛阈2次,每次间隔5min,取其均值在5～15s者。3组服药剂量同上,给药后30,60,90,120min,各测1次痛阈60s无痛觉者按60s计算,结果表明,由人工牛黄,珍珠组成的热必清有较强的镇痛效应。同时冰醋酸扭体法实验证实,热必清能明显抑制小鼠扭体反应。
3.解热作用^[4]
以珍珠、牛黄等中药组成的珍黄含片原料粉末(不含辅料)为供试样品。健康雄性家兔,体重大于1.5kg,选择正常体温38.3-39.2℃家兔试验:肌肉注射10%蛋白胨10ml/kg,使之发热,体温升高超过1℃后,灌胃给药于30,60,120mim各测体温一次结果:大剂量的珍黄含片对家兔有明显的解热作用。见表11-2-4。

表11-2-4 珍黄含片的解热作用

注:与正常体温比较:* * P<0.01;与致热后体温比较:△△P<0.01,n=7
4.抗炎作用^[4]
4.1 对大鼠角叉菜胶所致足肿胀的影响
雄性SD大鼠,体重200～230g,分成4组,珍黄含片灌胃给药,给药1h后,皮下注入1%角叉菜胶0.1ml致炎,每隔1h测量足肿胀1次,共6次。结果:珍黄含片有较好的抗炎作用,大剂量的抗炎作用更明显(P<0.01),用药后1～6h对足肿胀抑制为率29%～36%。

表11-2-5 对大鼠角叉菜胶足肿胀的影响

注:与生理盐水组比较:* P<0.05,* * P<0.01。
4.2 对大鼠棉球肉芽肿的影响
SD雄性大鼠,体重150～170g,每日灌胃给药1次,连续7d,给药第2d,戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉,于腹股沟放40mg消毒棉球各1个。末次给药后24h,处死大鼠,剥离棉球肉芽肿,60℃烘2h,称重计算,结果可见珍黄含片低剂量组及高剂量组与对照组比较,均有显著性差异。珍黄含片能显著抑制棉球肉芽肿生长。
5.对免疫系统的作用^[4]
5.1 对DNCB致敏小鼠迟发型皮肤超敏反应的影响
将体重18～22g雄性小鼠分组并灌胃给药,每天1次,于给药后的第4d,在小鼠颈部脱毛位以50%DNCB一丙酮溶液2μl致敏,致敏后的第7d在小鼠腹部脱毛的皮肤上,均匀涂布2.5%DNCB-丙酮溶液20μl进行攻击,24h后尾静脉注射1%伊文思蓝溶液10ml/kg,30min后处死小鼠,取腹部蓝染皮肤剪碎,用1:1丙酮生理盐水溶液2ml浸泡36h,离心,取上清液测光密度(OD)值(λ=610nm)结果见表11-2-7。

表11-2-6 对大鼠棉球肉芽肿的影响(±s)

注:与生理盐水组比较:**P<0.01

表11-2-7 对DNCB致敏小鼠迟发型皮肤超敏性反应的影响

注:与生理盐水组比较:*P<0.05
结果显示,珍黄含片2个剂量组均能明显地增强DNCB所致小鼠迟发型皮肤超敏反应。
5.2 对绵羊红细胞(SRBC)致敏小鼠溶血素生成的影响
雄ICR小鼠30只,体重18～22g,随机分为3组,按表11-2-8灌胃给药,每天1次,连续5d,给药的当天用10%SRBC 0.2ml腹腔注射免疫小鼠,致敏后第5d摘眼球采血,取血清40μl,加入生理盐水10ml,56℃水浴30min灭活补体,取此血清样本1ml,加入10% SRBC 0.5ml和用生理盐水稀释的1:10补体1ml混匀,37℃水浴温孵10min,移入冰浴终止反应,离心,取上清液1ml检测,计算半数溶血值(HC50),结果见表11-2-8。

表11-2-8 对SRBC致敏小鼠溶血素生成的影响

注:与生理盐水组比较:*P<0.05
珍黄含片的大剂量组(400mg/kg)的HC50生理盐水组比较,差异有显著意义(P<0.05)。
6.抑菌作用^[4]
用无菌蒸馏水将试验药物配制成不同浓度,即1.5g/ml、1g/ml、0.5g/ml、0.25g/ml、0.125g/ml。对照药物选用青霉素钠盐,稀释成100U/ml。
对不同种的细菌选用不同的培养基,经无菌消毒后,配成固体培养平皿、血平皿、巧克力平皿,将所需菌种移入肉汤培养基,培养后涂布于固体培养基。肺炎球菌、乙型链球菌及嗜血杆菌直接移种斜面后,再密集划线于培养皿,然后用打孔器打孔(内径8mm),加入不同浓度的药物于孔内,同时设青霉素对照,于37℃培养24h后观察结果,测量抑菌圈大小(mm),二次实验平均抑菌圈见表11-2-9。

表11-2-9 珍黄含片对9种细菌株的抑菌效果(抑菌圈直径,mm)

注:表内9种细菌株均为标准菌株
7.对小鼠的祛痰作用
取昆明种雄性小鼠,体重18～24g,按表5分组,实验的前1d晚上禁食,只给水,灌胃给药后15min,腹腔注射0.5%酚红溶液0.1ml/10g,30min后颈椎脱臼处死,分离气管,以5%NaHCO3溶液每次0.5ml灌胃洗气管共3次,合并3次洗液,用752型紫外分光光度计(λ=546nm)测定酚红的光密度值,结果见表11-2-10。

表11-2-10 对小鼠酚红排出量的影响

注:生理盐水组比较:* * P<0.01
实验可见,珍黄含片大剂量组(400mg/kg)与生理盐水组相比较有极显著性差异(P<0.01)。
【毒理研究】
急性毒性试验^[4]
预试验测不出小鼠100%死亡的剂量(DM)。最大耐受量试验证实珍黄含片小鼠1次灌胃最小致死量大于20g/kg,腹腔注射时LD50为4.18g/kg,LD50量信区间为:3.55～4.91g/kg。
【临床应用】
1.治疗慢性溃疡性结肠炎
张氏^[5]等报道用肠炎散Ⅰ,Ⅱ号(二者主要成分为牛黄、珍珠)治疗300例慢性溃疡性结肠炎,每日灌肠1次,30d为1疗程。
结果痊愈(症状消失,乙状镜检查结肠粘膜恢复正常,随访半年未有复发)122例,占40.7%;基本痊愈(症状消失,肠粘膜接近正常或未完全恢复)67例,占22.3%;好转(症状有所减轻,或肠粘膜有所改善者)102例,占34%;无效(症状及肠粘膜无改善)9例,占3%。总有效率97%。
2.治疗小儿慢性牙髓炎
刘氏^[6]报道用牛黄珍珠等组成的六神丸治疗小儿慢性牙髓炎40例,总有效率达90%。其中有效(疼痛缓解,无叩痛,或仅有轻微叩痛者)36例,无效(患牙脱落,需重新封失活剂)者4例。
朱氏^[7]用珠黄散治疗牙龈肿痛1例,用药2d面部肿胀消退,牙龈红肿痛消失。
3.治疗小腿溃疡
徐氏^[8]用牛黄珍珠散治疗小腿溃疡36例;其中男25例,女11例,年龄16～62岁;治疗时间最长46d,最短1周,结果33例痊愈,3例无效,总有效率92.4%。牛黄珍珠散对多种细菌有较强的抗菌作用,并能改善创面营养,改善病灶局部供血,减少炎性渗出提高免疫力,促进疮面修复。
4.其他
朱氏^[7]用珠黄散治疗甲沟炎,3d而愈;疖肿患者1例,2d而愈;治疗炎性痤疮也获良效。
牙龈肿痛:陆某,男35岁,牙龈肿痛3d,不能进食咀嚼。口腔科诊治后,给予抗生素、甲哨唑等药,牙龈肿痛仍存,一侧面部肿胀明显,给予珠黄散涂于红肿牙龈处,第2d面部肿胀消退、牙龈红肿痛也随之消失。
甲沟炎:李某,男,40岁,左拇趾外侧甲沟外红肿疼痛5d,行走后磨擦肿痛加重,曾外敷三黄膏3d,胀痛不退,即采用珠黄散调成浆,放置于护创膏上包扎拇趾甲沟处,第2d疼痛减轻,继敷3次,肿痛完全消失。
疖肿:1例女患者,36岁,会阴部右侧大阴唇处红肿硬疖1周余,约2cm×2cm大小,骑自行车时磨擦疼痛加重,痛苦难言。给予珠黄散处敷2d,硬疖变软,肿痛消失,1周后,局部已无任何瘢痕形迹。
炎性痤疮:青春期少男少女最易患痤疮并易感染,严重的可导致面部产生瘢痕及色素沉着,影响美观,而采用珠黄散局部涂擦后明显控制感染,而且不留瘢痕及色素。

牛黄 ♂

牛黄   牛黄 : 牛黄为牛科动物牛Bos taurus domesticus Gmelin的干燥胆结石,人工牛黄为牛胆汁或猪胆汁制造而成的 浅棕色或金黄色粉末,主要含有胆甾烷类和胆色素类等成分。
胆甾烷类有效部位及成分
【总胆固醇】
提取分离

检识测定
气相色谱法
标准曲线制备: 色谱柱: 3.5%OV-1,chromosorb W-HP,3.2mm×16mm玻璃柱; 检测器: FID; 柱 温: 16℃; 进样口温度:290℃; 载气流速: 高纯氮50mL/min,氢气约46mL/min,空气约470mL/min。精 密吸取胆固醇对照品溶液 (5mg/mL) 0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8mL分别置1mL量瓶中,各精密 加入正三十二烷内标溶液 (2.5mg/mL) 0.1mL,加正己烷稀释至刻度,进样分析,以对照品峰面积与内标 峰面积比值为纵坐标,胆固醇浓度为横坐标,绘制标准曲线。
样品测定: 精密称取研细的牛黄粉末0.1g,经提取分离得总胆固醇,置2mL量瓶中,精密加入正三十 二烷内标溶液0.1mL,正己烷定容,进样分析,由标准曲线计算含量。
【总胆汁酸】
提取分离

【胆酸、去氧胆酸】
结构式

胆酸

去氧胆酸

理化性质
胆酸: 白色结晶或粉末,味先苦后稍甜,在稀醋酸中结晶含一分子结晶水,mp 198℃,[α]_D²⁰+37° (c=0.6,乙醇),溶于水、乙醇、乙醚、氯仿、苯、丙酮、冰醋酸,可溶于氢氧化钠和碳酸钠溶液。
去氧胆酸: mp 176℃～178℃,[α]_D²⁰+55° (c=1,乙醇),溶于水、乙醇、乙醚、氯仿、苯、丙酮、 冰醋酸,可溶于氢氧化钠和碳酸钠溶液。
检识测定
方法一: 薄层色谱法

薄层色谱条件一览表

续表

注: 加*号者仅为检识用。
方法二: 高效液相色谱法

高效液相色谱条件一览表

方法三: 分光光度法
标准曲线制备: 精密量取胆酸对照品溶液 (0.5mg/mL) 0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL置具塞试管中, 分别加60%冰醋酸溶液稀释成1.0mL,加新配制的糠醛溶液 (1→100) 各1.0mL,冰浴放置5分钟,精密 加入硫酸溶液 (取硫酸50mL与蒸馏水65mL混合制成) 13mL,混匀,70℃水浴加热10分钟,迅速移至冰 浴中,放置2分钟,以相应试剂为空白,在605nm波长处测定吸收度,绘制吸收度-浓度标准曲线。
样品测定: 取样品约100mg,精密称定,加60%冰醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,过滤,弃去初滤液, 精密量取续滤液各1mL,分别置于甲、乙两个带塞试管中,于甲管中加新配置的糠醛溶液1mL,乙管中加 水1mL作空白,按标准曲线制备方法测定,计算含量。
胆色素类有效部位及成分
【胆红素】
检识测定
方法一: 分光光度法
标准曲线制备: 精密量取胆红素对照品溶液 (0.01mg/mL) 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL置具塞试管 中,加乙醇稀释至9mL,分别加入重氮化试剂1mL摇匀,于15℃～20℃暗处放置1小时,以相应溶剂为空 白,在533nm波长处测定吸收度,绘制吸收度-浓度标准曲线。
样品测定: 取药材细粉约10mg,精密称定,置锥形瓶中,加氯仿-乙醇 (7:3) 混合溶液60mL,盐酸 1滴,摇匀,置水浴上回流加热30分钟,放冷,移至100mL棕色量瓶中,再用少量混合溶液洗涤,并入量 瓶中,以上述混合溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取3mL置具塞试管中,照标准曲线制备方法测定,计算 含量。
方法二: 双波长紫外分光光度法
标准曲线制备: 精密称取胆红素对照品约10mg,置100mL棕色量瓶中,加氯仿溶解并稀释至刻度,摇 匀,精密量取5mL,置50mL量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。取对照品溶液,配制 成不同浓度,于533nm和580nm波长处测定吸收度,绘制吸收度差值 (△A) -浓度 (C) 标准曲线。
样品测定: 精密称取样品约10mg,加氯仿-盐酸乙醇混合液 (3:1),超声提取10分钟,定容至 100mL棕色量瓶中,精密吸取10mL置50mL棕色量瓶中,再精密吸取3mL定容至10mL,于533nm和 580nm测定吸收度,由标准曲线计算胆红素含量。
方法三: 高效液相色谱法

高效液相色谱条件一览表

方法四: 流动注射分光光度法
标准曲线制备: 系统条件: 反应管长80cm (0.7mm),采样体积50μL,采样时间15秒,注射时间为 10秒,Fc=3.6mL/min,F_CuSO4＝2.3mL/min,F_缓冲液＝2.3mL/min,测定波长340nm。待输出信号稳定后, 将蒸馏水注入流路做空白试验,然后将一系列标准溶液及试样依次注入,测定最大吸收度。线性关系: 精 密称取胆红素对照品10mg,置10mL量瓶中,加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度,摇匀。精密吸 取0.50,0.75,1.00,1.25,1.50mL分别置10mL量瓶中,加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀。 按实验方法进行测定,将浓度C (μg/mL) 与吸收度A进行线性回归,绘制标准曲线。
样品测定: 精密称取人工牛黄供试品约0.15g,置10mL量瓶中,加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀 释至刻度,摇匀。滤过,弃去初滤液,取续滤液注入流路分析,由标准曲线计算含量。

牛黄上清丸 《全国中药成药处方集》(天津方) ♂

牛黄上清丸 《全国中药成药处方集》(天津方)   牛黄上清丸 《全国中药成药处方集》(天津方) : 【组方药物】 黄连24克 生石膏120克 黄芩 75克 薄荷45克 莲子心60克 白芷 桔梗各24 克 菊花60克 川芎 赤芍各24克 当归75克 黄柏15克 荆芥穗24克 栀子75克 大黄120克 甘草15克 连翘75克 朱砂 明雄黄各18克 牛黄3克 冰片15克
【制剂用法】 上药中朱砂、雄黄、牛黄、冰片分 别研细,黄连等17味药轧为细粉,与上4味和匀,炼 蜜为丸,每丸重6克,蜡皮封固,阴暗干燥处保存,每 服1丸,日服1至3次,温开水送下。
【主要功效】 清火解毒,消肿止痛。
【适应病证】 三焦火盛,头痛目赤,口舌生疮, 咽喉肿痛,牙痛,大便秘结。
【注意事项】 孕妇忌服。
【方义分析】 此为临床常用方。方以牛黄清心 肝实火为主药;配菊花、薄荷、连翘、荆芥穗、白芷、川 芎、桔梗、甘草轻清上浮,疏风清热为辅药;桔便与甘 草配伍甘桔汤,可以利咽喉。佐以黄芩、黄连、黄柏、 栀子四味即黄连解毒汤苦寒泻火,清热解毒;加石膏 清泄气分实热;冰片辛凉散火,通窍利咽;又以大黄 苦寒泄下,荡涤瘀热;赤芍、当归、地黄清热凉血散 瘀。诸药配伍,具有良好的清热泻火,散风止痛功效。

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